[發明專利]一種分離純化EPA和DHA的制備方法

無效

• 申請號: 201210425297.7
• 申請日: 2012-10-31
• 公開（公告）號: CN103787862A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 王冰冰;劉根水;張大兵
• 申請（專利權）人: 江蘇漢邦科技有限公司
• 主分類號: C07C57/03
• 分類號: C07C57/03;C07C51/47
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及海洋生物中脂肪、油等生物分子提取分離技術領域，具體涉及一種分離純化EPA和DHA的制備方法。

背景技術

1978年Dyerberg等首次報道格陵蘭愛斯基摩人的心血管發病率低與食魚有關，魚油中EPA和DHA引起了人們的重視。大量研究證實，EPA、DHA具有降血脂、抗血小板聚集、緩和血栓形成、保護腦血管等作用，尤其是DHA還可以增加大腦功能，提高辨別力，增強記憶力和注意力。在大腦和視網膜上DHA還可通過膜聯蛋白的活性對神經細胞核視網膜光感受中的結構和功能發生作用，這有助于胎兒、嬰幼兒大腦椎體細胞核視網膜桿細胞生長、發育，孕婦服用DHA有助于胎兒腦細胞發育，特別是早產兒服用DHA以維護其視桿細胞的正常發育，保證不致產生由于缺少DHA所造成的視力減弱的遺憾。由于EPA、DHA的功效顯著，含DHA、EPA的產品大量上市，但現售產品由于含量不高，雜質較多，服用后會引起過氧化物中毒、腹瀉、消化不良，兒童服用會引起性早熟，服用劑量大等副作用，尤其不利于嬰幼兒服用。

為了提高EPA、DHA純度，國內外學者和生產廠家進行了廣泛地研究。現在主要的分離方法有：脂肪酶法、低溫結晶法、金屬鹽沉淀法、減壓分餾法、硝酸銀溶液萃取法等。但是，以上現有技術中的方法或因成本較高或因操作復雜都不能輕易的到高純度的DHA、EPA產品。

發明內容

本發明的目的在于針對目前在分離純化DHA、EPA過程中所存在的成本高、操作復雜以及純度不高的問題，提供一種采用半制備SFC分離系統制備高純度DHA、EPA單體的新方法，該方法包括以下步驟：

a.將含EPA和DHA混合物的魚油提取物粗品用甲醇或乙醇溶解，樣品濃度為1-200mg/ml，具體實施時，可根據實際溶解效果進行調整，過濾除去微小的固體不溶物，得到濾液作為分離粗品；

b.采用分析型SFC優化EPA和DHA單體的最佳分離洗脫條件，將其等比例放大，應用在填充硅膠填料的色譜柱上進行分離，在線收集EPA、DHA對應譜帶的餾分；

c.將步驟b中收集的EPA、DHA對應譜帶的洗脫液中的溶劑蒸干，即可得到色譜純為99.2%的EPA、DHA。

本發明的有益效果是可直接采用含EPA和DHA混合物的魚油提取物粗品來制備EPA、DHA單體，使用CO₂作為主要流動相，綠色環保，不用或使用少量有機試劑作為改性劑，生產成本低，且后處理簡單，適用于大規模制備。

具體實施方式

實施例1

1.取含EPA和DHA混合物的魚油提取物粗品，甲醇溶解，樣品溶度為5mg/ml，置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；

2.將樣品溶液注入半制備SFC分離系統，色譜柱尺寸為Φ10×250mm，C18填料，粒徑為5~45um，上樣量10mg，CO₂流速為0.8~3.0ml/min，甲醇作為改性劑，流速為0~0.5ml/min，溫度為40℃，背壓為9~15MPa。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為210nm，收集保留時間在5~27min(與EPA對應)和6~30min(與DHA對應)的餾分，經HPLC分析純度≥99.8%。

實施例2

1.取含EPA和DHA混合物的魚油提取物粗品，甲醇溶解，樣品溶度為10mg/ml，置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；

2.將樣品溶液注入半制備SFC分離系統，色譜柱尺寸為Φ10×250mm，C18填料，粒徑為5~45um，上樣量20mg，CO₂流速為1.0~5.0ml/min，甲醇作為改性劑，流速為0~1.0ml/min，溫度為40℃，背壓為9~15MPa。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為210nm，收集保留時間在5~25min(與EPA對應)和6~30min(與DHA對應)的餾分，經HPLC分析純度≥99.5%。

實施例3

1.取含EPA和DHA混合物的魚油提取物粗品，甲醇溶解，樣品溶度為10mg/ml，置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；

2.將樣品溶液注入半制備SFC分離系統，色譜柱尺寸為Φ25×250mm，C18填料，粒徑為5~45um，上樣量50mg，CO₂流速為1.0~10.0ml/min，甲醇作為改性劑，流速為0~2.0ml/min，溫度為40℃，背壓為10~18MPa。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為210nm，收集保留時間在5~25min(與EPA對應)和6~30min(與DHA對應)的餾分，經HPLC分析純度≥99.7%。