[發明專利]一種甲霜靈外消旋體的高效液相色譜拆分方法

無效

• 申請號: 201210423165.0
• 申請日: 2012-10-30
• 公開（公告）號: CN103787909A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 張大兵;居延娟;李枝玲
• 申請（專利權）人: 江蘇漢邦科技有限公司
• 主分類號: C07C235/16
• 分類號: C07C235/16;C07C231/24
• 代理公司: 暫無信息
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技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種甲霜靈對映體的拆分方法。

背景技術

甲霜靈(Metalaxy1)，化學名稱為N-(2-甲氧基甲乙酰基)-N-(2，6-二甲基苯基)-外消旋氨基酸甲酯。甲霜靈是新型高效內吸性殺菌劑，可內吸進入植物內，水溶性比一般殺菌劑高得多，可以透入新脂性小的卵菌的細胞膜，起殺菌作用，對卵菌綱中的霜霉菌和疫霉菌具有選擇性特效，例如對馬鈴薯晚疫病、葡萄霜霉病、啤酒花霜霉病、甜菜疫病、油菜白銹病、煙草黑脛病等都有良好的防治效果。可用于瓜類、蔬菜、葡萄、煙草等霜霉病，馬鈴薯晚疫病，煙草黑腥病等，持效期長。也可用于棉花猝倒病、谷子白發病，防治效果也十分理想。甲霜靈是外消旋體，其左旋體（R體）具有更高更強的殺菌性，將左旋體（R體）應用于植物病菌，則殺滅病菌更為徹底，而且藥效持續時間更久更長，這樣就減少了施藥次數．增長了施藥周期，提高了藥效、節約了成本、減少了對環境的污染。雖然甲霜靈從八十年代中期就開始進入中國市場，但是對其拆分的研究目前還處于分析階段。因而建立拆分甲霜靈外消旋體的方法具有很大的經濟社會效益。

發明內容

本發明的目的是提供一種甲霜靈對映體的高效液相色譜系統的拆分方法。

本發明為實現上述發明目的采用的技術方案如下：一種甲霜靈對映體的高效液相色譜的拆分方法，其特征在于用纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)為固定相，用甲醇和水的混合物為流動相，用高效液相色譜系統從甲霜靈外消旋物中拆分出高純度的R-甲霜靈和S-甲霜靈，包括一下步驟：

（1）將甲霜靈外消旋體溶于流動相中，濃度為：0～100mg/ml；

（2）用高效液相色譜系統拆分甲霜靈外消旋體；

（3）濃縮得到高純度的兩種甲霜靈對映體。

本發明具有以下技術效果：本發明采用高效液相色譜系統，從甲霜靈的外消旋體中拆分出具有光學純度的甲霜靈對映體，工藝簡單，產品質量穩定，溶劑采用甲醇，可回收利用，無污染，實現清潔生產。

具體實施方式

1、?色譜柱填料及流動相（溶劑）選擇

填料纖維素-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)涂覆型手性固定相，采用公知的方法（Okamoto?Y?,Kawashima?M?,?Hatada?K?J?.?Chromatomgr?.1986,363:173~186）制備，填料粒度為1~150um，微粒越小，粒徑分布越窄，越有利于分離；但粒徑越小系統壓力越大，最適宜的粒徑范圍是10~30um。

流動相（溶劑）為甲醇和水的混合物。

2、分離步驟

樣品用流動相溶解，濃度為0~100mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，纖維素-三(3，5．二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產品，粒徑為10um，流動相為甲醇和水，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經HPLC分析純度≥98.0%。

?實施例1

樣品用流動相溶解，濃度為20mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，色譜柱尺寸為Φ10×250mm，纖維素-三(3，5．二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產品，粒徑為10um，上樣量10mg，流動相為甲醇：水=80:20，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經HPLC分析純度≥98.0%。

實施例2

樣品用流動相溶解，濃度為50mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，色譜柱尺寸為Φ20×250mm，纖維素-三(3，5．二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產品，粒徑為10um，上樣量80mg，流動相為甲醇：水=85:15，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經HPLC分析純度≥98.2%。

實施例3

樣品用流動相溶解，濃度為100mg/ml，采用半制備型高效液相色譜儀進行分離純化，色譜柱尺寸為Φ20×250mm，纖維素-三(3，5．二甲基苯基氨基甲酸酯)填料為江蘇漢邦科技有限公司產品，粒徑為10um，上樣量120mg，流動相為甲醇：水=88:12，等度洗脫，。采用的紫外光度檢測器的檢測波長為330nm，收集甲霜靈，經HPLC分析純度≥98.2%。