[發(fā)明專利]一種聯(lián)合治療腫瘤的基因藥物及其應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210419699.6
• 申請日: 2012-10-29
• 公開（公告）號: CN102921020A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃來強(qiáng);嚴(yán)飛
• 申請（專利權(quán)）人: 清華大學(xué)深圳研究生院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K39/00;A61K38/17;A61P35/00;C12N15/63;C12N7/01
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因治療領(lǐng)域，具體涉及一種聯(lián)合治療腫瘤的基因藥物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤的快速增殖和惡性轉(zhuǎn)移得益于腫瘤新生血管的生成增加以及腫瘤細(xì)胞的凋亡減少等多種因素的影響。針對各種因素相應(yīng)通路中的關(guān)鍵基因或靶標(biāo)蛋白正越來越多被科學(xué)家們研究并成功應(yīng)用于臨床。但是，在大多數(shù)情況下，機(jī)體對腫瘤治療的反應(yīng)是無效和微弱的。其主要原因在于惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)長期的、多階段的、多基因改變累積的過程，腫瘤在與機(jī)體的對抗和選擇過程中受多種信號通路的影響，單一的改變某一個(gè)基因或某一條信號通路往往難于取得令人滿意的效果。因此，通過同時(shí)調(diào)控腫瘤中多條信號通路的多個(gè)基因來研究抑制腫瘤生長增殖情況，對于明確腫瘤的發(fā)生和發(fā)展以及開展合理的治療方案均有著重要的意義。

近年來，對新生血管生成與腫瘤生長、侵襲及轉(zhuǎn)移等的關(guān)系進(jìn)行了深入研究，腫瘤血管新生對于腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移具有重要作用。Pepper（Arterioscler?Thromb?VascBiol.1997,17(4):605）的研究表明，實(shí)體瘤的生長、發(fā)展可分為血管前期和血管化期。在腫瘤形成的早期，瘤體內(nèi)并無血管生成，此為血管前期。這時(shí)的腫瘤生長依靠氧、營養(yǎng)物質(zhì)的彌散來維持，腫瘤直徑一般僅能長到2-3mm。此期的腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡處于平衡狀態(tài)，生長緩慢，可持續(xù)多年，相當(dāng)于臨床上的原位癌，幾乎不發(fā)生轉(zhuǎn)移。腫瘤的進(jìn)一步生長有賴于隨后的腫瘤血管生成的啟動(dòng)，促使腫瘤形成新生血管，進(jìn)入血管化期。此期腫瘤組織主要以血流灌注的方式獲取營養(yǎng)，腫瘤細(xì)胞呈指數(shù)生長且凋亡減少，腫瘤細(xì)胞的增殖和凋亡平衡被破壞，導(dǎo)致腫瘤生長加速。

內(nèi)皮抑素（Endostatin）由膠原蛋白XⅧ的羧基末端非膠原區(qū)內(nèi)的184個(gè)氨基酸構(gòu)成，其分子量為20KD。Endostatin對體外內(nèi)皮細(xì)胞具有明顯的增殖抑制活性，體內(nèi)亦可特異性地抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖和新生血管的生成，從而抑制腫瘤生長。Endostatin發(fā)揮抑瘤作用的特點(diǎn)有：①對腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖有選擇性抑制作用；②對生長靜止的內(nèi)皮細(xì)胞無作用；③抑制腫瘤有量效依賴關(guān)系；④對不同類型的腫瘤的抑瘤率相近；⑤無耐藥傾向、無不良反應(yīng)。

腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體（tumor?necrosis?factor-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL）是腫瘤壞死因子（tumornecrosis?factor,TNF）超家族的成員之一。它能選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，對大多數(shù)正常細(xì)胞無殺傷作用。TRAIL可通過與細(xì)胞膜上的死亡受體結(jié)合而激活凋亡信號通路，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的凋亡。與其他TNF家族成員相比，TRAIL抗腫瘤活性強(qiáng)，對正常細(xì)胞幾乎無毒性，因此受到人們的廣泛關(guān)注。

腫瘤基因治療的迅速發(fā)展使其成為除放療、化療和手術(shù)治療之外的第四種腫瘤治療模式。在眾多的基因治療載體中，應(yīng)用腺病毒作為基因治療的載體最為廣泛，已經(jīng)報(bào)道的1000多種基因治療的臨床方案中，約26%的基因治療方案是用腺病毒作為載體。與其他病毒載體相比，腺病毒載體具有許多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，表現(xiàn)在：①腺病毒顆粒相對穩(wěn)定，病毒基因組重排頻率低，外源基因插入片段在病毒復(fù)制幾個(gè)周期后仍可保持不變，易于重組DNA技術(shù)操作；②安全性較好，腺病毒無需整合進(jìn)宿主細(xì)胞基因組中，目的基因在宿主細(xì)胞基因組外游離狀態(tài)下表達(dá)，整合突變致癌可能性小，基因毒性低；③腺病毒基因組較大（36kb），絕大多數(shù)基因組（約35kb）均能被外源基因取代，插入大片段外源性基因的潛力大；④有較大的宿主范圍，可以感染肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮等多種人體細(xì)胞，對于受體細(xì)胞是否處于分裂期要求不嚴(yán)格；⑤腺病毒載體容易將外源基因直接轉(zhuǎn)移到靶細(xì)胞中，并有效表達(dá)成活性蛋白。以上一些優(yōu)勢使得腺病毒成為應(yīng)用最為廣泛的基因治療載體。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種聯(lián)合治療腫瘤的基因藥物及其應(yīng)用

本發(fā)明提供的用于預(yù)防和/或治療腫瘤的組合物，其為如下1）-3）中的任意一種：

1）含有Endostatin蛋白編碼基因的重組病毒和含有TRAIL蛋白編碼基因的重組病毒組成的組合物；

2）由Endostatin蛋白和TRAIL蛋白組成的組合物；

3）含有Endostatin蛋白編碼基因的重組載體和含有TRAIL蛋白編碼基因的重組載體組成的組合物。

上述組合中，所述Endostatin蛋白為人源Endostatin蛋白；所述TRAIL蛋白為人源TRAIL蛋白。