[發(fā)明專利]中慢生根瘤菌ZY1及其在土壤修復中的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210417029.0
• 申請日: 2012-10-26
• 公開（公告）號: CN102876621A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發(fā)明（設計）人: 滕應;李秀芬;駱永明;李振高
• 申請（專利權）人: 中國科學院南京土壤研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 唐循文

技術領域

本發(fā)明屬于微生物技術領域，尤其涉及一種中慢生根瘤菌ZY1及其在多氯聯(lián)苯污染土壤修復中的應用。

背景技術

多氯聯(lián)苯（Polychlorinated?biphenyls，PCBs）作為一類典型的持久性有機污染物(Persistent?organic?Pollutants，POPs)，廣泛分布于各類環(huán)境介質中，土壤被認為是PCBs最大的庫和匯。PCBs污染土壤的微生物修復技術中需要解決的首要問題是高效降解菌株的篩選和構建。1973年Ahmed和Focht篩選出兩株對鹵代聯(lián)苯具有降解效果的無色桿菌（Achromobacter）以來，已分離出多種具有PCBs降解功能的細菌菌株。滕應等（2005，2006）研究發(fā)現(xiàn)了PCBs復合污染土壤中存在部分優(yōu)勢革蘭氏陰性降解菌，如鞘氨醇單胞菌等。但是，有關能降解PCBs的根瘤菌種質資源很少被發(fā)現(xiàn)。目前關于紫云英根瘤菌對PCBs污染土壤的修復效果尚無報道。鑒此，本專利從PCBs污染農(nóng)田的紫云英根瘤中分離篩選出一株對PCBs具有良好降解性能的中慢生根瘤菌ZY1，研究了紫云英根瘤菌對PCBs復合污染農(nóng)田土壤的修復效應，為進一步研發(fā)PCBs污染土壤的生物修復提供了科學依據(jù)和新思路，具有十分廣泛的應用潛力。

發(fā)明內(nèi)容

解決的技術問題：本發(fā)明的目的在于針對生產(chǎn)實踐中的實際問題和需求，提供了一種能夠降解多氯聯(lián)苯（如PCB77）的微生物資源。

技術方案：一種中慢生根瘤菌（Mesorhizobium?sp.strain?ZY1），該菌株已在國家知識產(chǎn)權局指定的保藏單位保藏，保藏日期為2012年9月25日，保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?No.6622。中慢生根瘤菌（Mesorhizobium?sp.strain?ZY1）在多氯聯(lián)苯污染土壤中的修復應用。中慢生根瘤菌（Mesorhizobium?sp.Strain?ZY1）在多氯聯(lián)苯污染土壤修復中的應用。中慢生根瘤菌（Mesorhizobium?sp.strain?ZY1）的培養(yǎng)基，按質量比組成為：NaCl?1.00g，NH₄NO₃?1.00g，K₂HPO₄?1.50g，KH₂PO₄?0.50g，MgSO₄.7H₂O?0.50g，添加PCB77（3，3'，4，4'-四氯聯(lián)苯），使其濃度達到15mg/L，pH7.0~7.5。

本發(fā)明提供一種多氯聯(lián)苯的降解菌，其菌株是一株革蘭氏陰性菌ZY1（2012年9月25日保藏于中國微生物菌種保存管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC?No.6622），經(jīng)鑒定為中慢生根瘤菌（Mesorhizobium?sp.)。ZY1在甘露醇酵母汁瓊脂培養(yǎng)基（YMA）培養(yǎng)基（按質量配比為：甘露醇10.0g，酵母粉0.4g，K₂HPO₄?0.5g，MgSO₄?0.2g，NaCl?0.2g，微量元素溶液1mL，加超純水至1L，pH7.0~7.2。微量元素溶液（g/L）：H₃BO₃?2.86g，MnSO₄?1.81g，ZnSO₄?0.22g，CuSO₄?0.80g，H₂MoO₂?0.02g）平板上培養(yǎng)24h后，菌落乳白色、圓形、黏質半透明、邊緣整齊、表面隆起、濕潤光滑，菌落直徑一般在1.0~2.5mm。經(jīng)染色鏡檢，該菌為革蘭氏陰性，菌體呈長桿狀（0.5~0.6μm×1.8~3.8μm）（見圖2、圖3）。

該菌具有較高的降解多氯聯(lián)苯的能力。將降解多氯聯(lián)苯的Mesorhizobium?sp.strain?ZY1CGMCC?No.6622菌株接種于甘露醇酵母汁瓊脂培養(yǎng)基（YMA）搖瓶中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；將上述培養(yǎng)好的菌種按10%vt的接種量接種入500mL三角瓶，培養(yǎng)至對數(shù)生長期。該菌株ZY1能以PCBs為唯一碳源生長，并對溶液中PCB77具有較高的降解效率。在15mg/L初始濃度條件下，第4d、第7d、第10d時其降解率分別達到了45.3%、51.0%和62.7%。可見，該菌株對多氯聯(lián)苯具有較好的降解作用（見圖6）。