[發明專利]生物滅蚊劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201210416722.6
• 申請日: 2012-10-28
• 公開（公告）號: CN102907458A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 蘇曉慶
• 申請（專利權）人: 鄭文定;蘇曉慶
• 主分類號: A01N63/04
• 分類號: A01N63/04;A01N63/02;A01P7/04
• 代理公司: 貴陽東圣專利商標事務有限公司 52002
• 代理人: 袁慶云

1.?一種生物滅蚊劑，其特征在于：由滅蚊真菌與滅蚊細菌復配制得，以1g濕菌絲的滅蚊真菌計，配以滅蚊細菌蘇云金桿菌以色列變種個數為1.4×10⁴～1.4×10¹⁸或配以滅蚊細菌球形芽孢桿菌的個數為2.5×10⁴～2.5×10²⁰。

2.如權利要求1所述的生物滅蚊劑，其特征在于：滅蚊真菌為貴陽腐霉或卡地腐霉。

3.一種生物滅蚊劑的制備方法，包括以下步驟：

（1）采用SFE或KPYG2液體培養基搖床培養滅蚊真菌?5天，培養溫度25℃±1℃，搖床轉速120rpm；濾出菌絲，無菌水洗滌3次，加水至原體積，粉碎機高速粉碎10秒，備用；?

（2）配制1%～3%（W/V）海藻酸鈉溶液；

（3）將滅蚊真菌菌絲懸液與海藻酸鈉溶液按1:4比例混合，拌勻；

（4）將上述混合液緩慢滴入1%～5%（W/V）氯化鈣溶液,微膠囊顆粒形成，沉淀，0.5～3小時后濾出微膠囊，清水沖洗備用；

（5）接種滅蚊細菌于滅蚊細菌液體培養基,?搖床培養，轉速120rpm,?溫度30℃±1℃；48小時后，離心收集芽孢，用時稀釋至以下密度：1.4×10⁴～2.5×10²⁰，得芽孢懸液；

（6）按1～10ml細菌芽孢懸液/100g微膠囊的比例將芽孢懸液與微膠囊混勻，包裝。

4.一種生物滅蚊劑的制備方法，包括以下步驟：

（1）采用SFE或KPYG2液體培養基搖床培養滅蚊真菌?5天，培養溫度25℃±1℃，搖床轉速120rpm；濾出菌絲，無菌水洗滌3次，加水至原體積，粉碎機高速粉碎10秒，備用；?

（2）將準備好的滅蚊真菌菌液在無菌條件下加入BF培養基，每100克（濕重）培養基加菌液15ml,拌勻，靜置培養，培養溫度25℃±1℃；?

（3）采用滅蚊細菌液體培養基，接種滅蚊細菌，搖床培養48小時，搖床速度：120rmp,?培養溫度30℃±1℃；將培養好的菌液在無菌條件下加入HF培養基，每100克（濕重）培養基加菌液15ml，拌勻，靜置培養，培養溫度30℃±1℃；

（4）5天后，將上述培養物按滅蚊真菌培養物:滅蚊細菌培養物=1:3的比例均勻拌在一起，包裝。

5.如權利要求3或4所述的生物滅蚊劑的制備方法，其中KPYG2培養基的制備方法為：將1.5克蛋白胨、1.5克酵母粉?、3.0克葡萄糖、0.025克膽固醇、0.11克無水氯化鈣、1.0克玉米油混合，加水至1000毫升，用時121℃滅菌30min。

6.如權利要求3或4所述的生物滅蚊劑的制備方法，其中SFE的制備方法為：生葵花籽100克加水1000毫升，粉碎，6層紗布過濾，濾液再加水至2000毫升；分裝冷凍于-20℃，

用時，取出解凍，121℃滅菌30min。

7.如權利要求3或4所述的生物滅蚊劑的制備方法，其中滅蚊細菌液體培養基為Bti液體培養基，其制備方法為：將0.7g酵母膏、0.2g硫酸鎂、1g蛋白胨、1g磷酸氫二鉀、1g葡萄糖、和0.2g硫酸銨混合，加蒸餾水至1000ml，pH值為7.0-7.2，121℃滅菌30min。

8.如權利要求3或4所述的生物滅蚊劑的制備方法，其中滅蚊細菌液體培養基為Bs液體培養基，其制備方法為：將3.0g蛋白胨、5.0g牛肉膏、5.0g酵母膏、0.01g?MnCl₂.4H₂O、0.1g?CaCl₂.2H₂O、0.2g?MgCl₂.6H₂O，加蒸餾水至1000ml，pH值為7.0-7.2，121℃滅菌30min。

9.如權利要求3或4所述的生物滅蚊劑的制備方法，其中BF培養基的制備方法為：米糠粉加面粉按1:1-3:1混合，再加蒸餾水拌勻，比例為60ml水/100g糠面混合物，121℃滅菌30分鐘。

10.如權利要求3或4所述的生物滅蚊劑的制備方法，其中HF培養基的制備方法為：麥麩粉加面粉按1:1-3:1混合，再加蒸餾水拌勻，比例為60ml水/100g麩面混合物，121℃滅菌30分鐘。