[發明專利]用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統及分離方法

有效

• 申請號: 201210414654.X
• 申請日: 2012-10-25
• 公開（公告）號: CN103063753A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 耿信篤
• 申請（專利權）人: 西安奧嵐科技開發有限責任公司;西北大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/10
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;周玉梅

1.一種用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，該多維液相色譜分離系統包括檢測裝置，其特征在于，所述多維液相色譜分離系統包括流動相儲罐、第一輸液裝置和第二輸液裝置、第一進樣裝置和第二進樣裝置、分離裝置、包括至少一個集存器的集存裝置、至少兩個排液裝置以及流路切換裝置，其中：

1）所述流動相儲罐儲存用于多維液相色譜分離的流動相；

2）所述第一輸液裝置和第二輸液裝置彼此獨立地從所述流動相儲罐取出適用于液相色譜分離的流動相并將該流動相輸送至所述多維液相色譜分離系統的流路中，并且可彼此獨立地調節和計量流量；在第一維分離時，所述第一輸液裝置將適用于該第一維分離的流動相輸送至第一進樣裝置；在第二維或更多維分離時，所述第一輸液裝置將適用于該第二維或更多維分離的流動相輸送至所述集存裝置，并推動儲存于所述至少一個集存器中的中間餾分至所述第二進樣裝置，與此同時所述第二輸液裝置從所述流動相儲罐取出適用于該第二維或更多維分離的流動相輸送至所述第二進樣裝置；

3）所述第一進樣裝置從系統外引入原樣并使其隨來自第一輸液裝置的流動相同時進入所述分離裝置；第二進樣裝置包括進樣混合器，該進樣混合器使來自所述集存裝置中的至少一個集存器的中間餾分和流動相與來自所述第二輸液裝置的流動相混合從而得到進樣混合液，并將該進樣混合液送入所述下一維分離裝置；

4）所述分離裝置包括色譜柱切換單元和n根色譜柱，或者包括具有分離模式總數為m的色譜柱，并通過所述色譜柱使進入分離裝置的液體分離成不同的餾分，其中所述色譜柱切換閥使進入所述分離裝置的液體選擇性地流入所述n根色譜柱中的一根色譜柱，n為非負整數，m為所述多維液相色譜分離系統中所用的不同分離模式的個數，并且n與m之間滿足下式：

m≥n????(1)

m=n+q_i????(2)

其中，i為正整數，q_i為具有i種分離模式的色譜柱個數；

5）所述集存裝置包括p個集存器切換單元，其中p大于或等于1，所述集存器切換單元使進入所述集存裝置的液體選擇性地流入所述集存裝置中的至少一個，該集存器將經每一維分離后得到的不同餾分中需要進行進一步分離的中間餾分收集并儲存于至少一個集存裝置中；

6）所述至少兩個排液裝置將流路中的液體排出至系統外；

7）所述流路切換裝置，其由與上述裝置相連通的閥門和管路所組成，通過對所述流路切換裝置中的閥門進行切換，所述流路切換裝置除了形成常規液相色譜分離中的流路外，還形成用于進行多維液相色譜分離的流路；

該多維液相色譜分離系統的特征還在于，所述第一輸液裝置和第二輸液裝置對其輸送的用于第二維或更多維分離的流動相的量進行調節和計量，從而對用于第二維或更多維分離的所述進樣混合液中的洗脫劑濃度進行調節，在進樣時，所述進樣混合液中的洗脫劑濃度低于該進樣混合液所包含的中間餾分中的所有需要在該第二維或更多維分離中得以保留的目標蛋白的臨界遷移洗脫劑濃度。

2.根據權利要求1所述的用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，其特征在于，所述下一維分離裝置為具有混合分離模式的分離裝置，或者為具有與上一維分離模式不同的單一模式的分離裝置。

3.根據權利要求2所述的用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，其特征在于，所述具有混合分離模式的分離裝置為具有二維分離模式的分離裝置。

4.根據權利要求1所述的用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，其特征在于，在周期性清洗色譜系統時，將強洗脫液接入任何一個管路和裝置中。

5.根據權利要求1所述的用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，其特征在于，所述第一輸液裝置和所述第二輸液裝置分別由多元梯度單元和泵組成，所述多元梯度單元具有多個輸液通道并且可輸送和計量各通道的流量。

6.根據權利要求1所述的用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，其特征在于，所述第一輸液裝置和所述第二輸液裝置分別為具有多個輸液通道并且可輸送和計量各通道流量的第一泵和第二泵，每個泵均能獨立地輸送的四種流動相。

7.根據權利要求6所述的用于蛋白分離的多維液相色譜分離系統，其特征在于，對于分析型多維液相色譜分離系統，所述泵為將液體加壓至40兆帕以上的高壓泵；對于制備型和生產型多維液相色譜分離系統，所述泵為將液體加壓至20兆帕以上的高壓泵。