[發(fā)明專利]一種貫眾的繁殖方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210410134.1
• 申請日: 2012-10-25
• 公開（公告）號: CN102860262A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張開梅;方炎明;沈羽;萬勁
• 申請（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京君陶專利商標(biāo)代理有限公司 32215
• 代理人: 沈根水

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及的是植物的繁殖方法，特別是一種貫眾的繁殖方法。

背景技術(shù)

貫眾(Cyrtomium?fortunei)為鱗毛蕨科（Dryopteridaceae）多年生常綠草本，以根狀莖及葉柄殘基入藥，具有清熱解毒、止血、殺蟲的作用，常用于治療流行性感冒、乙型肝炎、病毒性肺炎、功能性子宮出血及蟲積腹痛等癥；還用于治療高血壓、頭暈、頭痛、慢性鉛中毒等癥（劉漢珍，俞浩，許文，何勝利．貫眾的繁殖方法及栽培技術(shù)．中國野生植物資源，2005，24（3）：60-63）。同時(shí)，貫眾又是一種優(yōu)美的觀賞植物和良好的水土保持植物（石雷．觀賞蕨類．北京：中國林業(yè)出版社，2002，151-152；劉漢珍，俞浩，許文，何勝利．貫眾的繁殖方法及栽培技術(shù)．中國野生植物資源，2005，24（3）：60-63）。

中藥貫眾的來源極其復(fù)雜，各地均使用當(dāng)?shù)鼗蚺R近地區(qū)所生產(chǎn)的多種蕨類植物的根莖。目前市售的貫眾藥材除C.?fortunei外，還有粗莖鱗毛蕨（Dryopteris?Crassirhixoma）、蛾眉蕨（Lunathyrium?acrostichoides）、單芽狗脊（Wood?wardia?unigemmata）、紫萁（Osmunda?Japonica）等30余種之多，分屬于6個(gè)科。通過本草考證,中藥貫眾的藥用來源應(yīng)是C.?fortunei（夏志俊．中藥貫眾本草原植物考證．中藥材，1988，5：23-25；張麗軍，田少庫，吳建華．貫眾的研究進(jìn)展．陜西中醫(yī)，2002，23(8):748-749）。通過10味中草藥（貫眾、黃連、板藍(lán)根、黃芪、苦參、連翹、白術(shù)、葛根等）對沙門氏菌的體外抑菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，貫眾、黃連對沙門氏菌的抑菌作用最強(qiáng)（李國旺，苗志國，趙恒章．板藍(lán)根等10種中草藥對沙門氏菌的體外抑菌試驗(yàn)．貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（2）：142-144）。貫眾中含有的間苯三酚類化合物，很少隨植物的年齡、采集季節(jié)而變化，具有強(qiáng)力的驅(qū)蟲作用，根狀莖的粉末和粗提取物自古以來作為驅(qū)蟲藥物被沿用。其明顯的活性和分類學(xué)價(jià)值是19世紀(jì)以來人們對其進(jìn)行大量化學(xué)研究的原因（周榮漢，段金廒．植物化學(xué)分類學(xué)．上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2005，337-338）。

由于貫眾的人工繁殖栽培技術(shù)相對滯后，導(dǎo)致目前市售的貫眾藥材主要來源于東北、華北和長江中下游地區(qū)的野生貫眾資源。且由于市場需求量較大，使得這些地區(qū)的貫眾資源被過度開采，野生貫眾資源遭到嚴(yán)重破壞。

貫眾的人工繁殖方法有分株繁殖和孢子繁殖。其中，分株繁殖的生長周期長且效率低，不利于藥用貫眾的規(guī)模化生產(chǎn)。貫眾孢子繁殖技術(shù)一般是將貫眾孢子播種于混合土壤培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)（劉漢珍，俞浩，許文，何勝利．貫眾的繁殖方法及栽培技術(shù)．中國野生植物資源，2005，24（3）：60-63；吳芹．幾種觀賞蕨類植物的繁殖技術(shù)研究[D]．南京：南京林業(yè)大學(xué)，2007），該方法培養(yǎng)出的貫眾幼孢子體大約自播種后第110－190天出現(xiàn)，較本發(fā)明得到幼孢子體的時(shí)間晚45－125天，貫眾的繁殖速度相當(dāng)慢。徐艷使用貫眾孢子無菌培養(yǎng)的方法，先用5%?NaOCl溶液（每?100?ml?該溶液中含?0.1ml?吐溫-80）將孢子滅菌?4?min，然后按4300個(gè)孢子/cm²的接種量，將貫眾孢子接種于1/2MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，在孢子接種后?80～90天可以看到幼孢子體產(chǎn)生（徐艷．觀賞蕨類植物種質(zhì)超低溫保存研究[D]．北京：北京林業(yè)大學(xué)，2006）。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提出的是一種貫眾的繁殖方法，其目的旨在彌補(bǔ)現(xiàn)有貫眾繁殖技術(shù)存有的培育周期長、成本高和效率低等不足。將貫眾的孢子經(jīng)消毒后，接種于MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，獲得孢子體苗，再經(jīng)移栽得到貫眾。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案：一種貫眾的繁殖方法，包括如下工藝步驟：

一、培養(yǎng)基配制；

二、貫眾孢子的滅菌；

三、接種及培養(yǎng)；

四、貫眾幼孢子體苗的移栽及管理。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明彌補(bǔ)了現(xiàn)有貫眾繁殖技術(shù)培育周期長、成本高和效率低等的不足，開辟了一條人工繁殖貫眾的新途徑。用少量的孢子材料，即可快速繁育出大量孢子體，65天即可成苗，成苗率可達(dá)97％左右，使貫眾的規(guī)模化工業(yè)生產(chǎn)成為可能，從而滿足市場對貫眾的需求，同時(shí)可減少對其野生資源和環(huán)境的破壞。此外，本發(fā)明還為開展該物種遺傳育種和保護(hù)生物學(xué)等方面的研究提供了良好的試驗(yàn)體系，具有廣泛的應(yīng)用前景。?

具體實(shí)施方式

下述實(shí)施例中所用方法如無特別說明均為常規(guī)方法。

實(shí)施例1