[發明專利]與小麥抗條銹病基因相連鎖的分子標記、其獲得方法及應用

有效

• 申請號: 201210407964.9
• 申請日: 2012-10-24
• 公開（公告）號: CN103074333A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 鄭有良;陳國躍;陳時盛;魏育明;劉亞西;蒲至恩;鄧梅
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

1.與小麥抗條銹病基因相連鎖的分子標記，其特征在于，使用簡并引物：上游引物：5’-AAGTGGAACAAGGTTACG-3’；下游引物：5’-GGIGGIGTIGGIAAIACIAC-3’擴增而得。

2.權利要求1所述的分子標記在鑒定小麥抗條銹病方面的應用。

3.一種鑒定小麥抗條銹病的方法，其特征在于，所述方法包括使用簡并引物：上游引物：5’-AAGTGGAACAAGGTTACG-3’；下游引物：5’-GGIGGIGTIGGIAAIACIAC-3’進行擴增的步驟。

4.一種獲得與小麥抗條銹病基因相連鎖的分子標記的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

（1）以感病小麥品種臺長29為母本，抗病品種HRMSN-81為父本，構建F₂遺傳作圖群體，構建的F₂群體為抗條銹病基因遺傳作圖群體；

（2）用提取小麥親本幼苗及其F₂群體單株DNA；

（3）采用抗病基因類似序列多態性分子標記技術進行小麥條銹病抗性分子標記的篩選，其中，使用簡并引物：上游引物：5’-AAGTGGAACAAGGTTACG-3’；下游引物：5’-GGIGGIGTIGGIAAIACIAC-3’擴增抗病親本、感病親本、抗病基因池、感病基因池以及它們的F₂遺傳作圖群體得到RGAP特異分子標記Xwgp_-160bp，經過連鎖性鑒定，發現該標記與小麥條銹病抗性基因連鎖。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，采用RGAP分子標記進行篩選與小麥抗條銹病基因相連鎖分子標記的方法是：

（1）使用RGAP引物在抗病親本、感病親本、抗病基因池、感病基因池以及它們的F₂遺傳作圖群體中進行DNA多態性分析；

（2）分子標記的連鎖性分析：對HRMSN-81與感病親本臺長29雜交獲得的F₂單株抗性進行田間鑒定，調查F₂單株抗病性，分別提取F₂單株DNA，用與步驟（1）同樣的反應體系、引物及程序進行單株PCR擴增，統計抗、感單株標記帶的出現頻率和交換類型并計算交換值計算標記與抗條銹病基因之間的遺傳距離。