[發明專利]用于質譜法檢測的底物和內標

無效

• 申請號: 201210407558.2
• 申請日: 2007-03-13
• 公開（公告）號: CN102943106A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發明（設計）人: B·賽達
• 申請（專利權）人: 珀金埃爾默健康科學股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/34
• 分類號: C12Q1/34;G01N27/62
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;張全信

本申請是分案申請，原申請的申請日為2007年3月13日、申請號為200780014149.3(PCT/US2007/063894)、發明名稱為“用于質譜法檢測的底物和內標”。

相關申請的交叉參考

本申請要求2006年3月13日提交的美國臨時專利申請序列號60/781,855的優先權，其被引入本文作為參考。

發明領域

本發明涉及分析試劑和基于質譜法的方法，所述方法使用這些試劑來同時量化樣品中的蛋白質。更具體而言，本發明涉及使用質譜法量化溶酶體酶活性的多元分析和試劑。

發明背景

溶酶體貯積病是一組遺傳病癥，其特征為身體內特定酶的缺乏，這導致身體不能分解代謝物質。作為一個實例，法布里病是每40,000人之一人中可見的溶酶體貯積病。其是由于α-半乳糖苷酶的缺乏，然后這導致身體不能分解被稱為球形三酰神經酰胺(globotriaosylceramide)的特定脂質。第二個實例是高歇病，由于不能分解被稱為葡糖神經酰胺(也稱為葡糖腦苷脂)的脂物質（fatty?substance）或脂質（lipids）引起的溶酶體貯積病。患有高歇病的個體不能制造葡糖腦苷脂酶，一種分解這些脂質所需要的酶。然后，這些脂質聚集在肝、脾和骨髓的細胞內。第三個實例是蓬珀病，由于被需要用來分解某些被稱為糖原的糖的酶——酸性α-葡糖苷酶——的缺乏引起的溶酶體貯積病。當酶——酸性α-葡糖苷酶——缺少時，糖原在身體內的多種組織和器官中聚集。

這些疾病大部分是兒科疾病。在大多數患者中，患者在出生時是正常的，在過后的一些時間里漸進地開始神經學上惡化。在一些患者中，該疾病在成年期表現。臨床表型取決于生化缺陷的類型和嚴重性。這些溶酶體缺陷癥的一些例如蓬珀病和克臘比病，主要表現在嬰兒期。因此，已經正在努力開發在臨床癥狀開始前檢測這些病癥的方法，以便可以開始治療介入。

在過去的十年內，檢測代謝性疾病的實驗室已經將串聯質譜法引入其新生兒篩查計劃。串聯質譜法在臨床繼續得到流行，因為該技術允許在單一樣品中分析多種代謝物。例如，該技術已被作為檢測在新生兒中遺傳代謝性疾病的常規臨床實踐，在該技術中使用干血斑樣品(Schulze?A等,Pediatrics?2003;111:1399-406)。盡管溶酶體酶活性可使用串聯質譜法量化(Gelb?MH等,Clinical?Chemistry?50:10,1785-1796,2004)，但是發表的分析方法不容易適用于臨床情況，這是因為麻煩的過程和苛刻的分析成分例如氯仿。

因此，繼續需要改進用于檢測溶酶體缺陷癥的方法和組合物。

發明概述

根據本發明的實施方式，提供使用質譜法檢測酶反應的改進的組合物和方法。

發明的底物(substrate)具有A—(B¹—B²—B³)的通式，其中A是單糖或二糖，B¹是C₁-C₂₀烷基、具有取代的C₆-C₂₀芳基的C₁-C₂₀、含有N、O或S雜原子的C₆-C₂₀雜環；B²是