[發明專利]一種利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法

無效

• 申請號: 201210406361.7
• 申請日: 2012-10-23
• 公開（公告）號: CN102876765A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 汪少蕓;趙立娜;饒平凡
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/30;C07K1/34
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）、堿溶酸沉：利用堿溶酸沉法提取茶渣蛋白；

（2）、酶解：采用蛋白酶對提取的茶渣蛋白進行有限酶解，滅酶，冷凍干燥，制備茶渣蛋白多肽復合物；

（3）、超濾：采用超濾膜，選擇截留分子量分別為＜3500?Da、3500～8000?Da、＞8000?Da的超濾膜對茶渣蛋白多肽復合物溶液進行分離，獲得分子量＜3500?Da、3500～8000?Da或＞8000?Da的具有抗氧化活性的多肽復合物；

（4）、冷凍干燥。

2.根據權利要求1所述利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于：步驟（1）中，所述堿溶酸沉的操作如下：首先將茶渣沸水浴20-30分鐘后紗布過濾得除雜后的茶渣，將除雜后的茶渣與0.06-0.25mol/L?NaOH以w/v?1：20-60的比例混合進行堿提，提取時間20-60min，溫度50-100℃，提取后用紗布過濾，濾液為堿提的茶渣蛋白溶液，用鹽酸調節堿提的茶渣蛋白溶液pH至2.5-5.0進行蛋白沉淀，離心得沉淀蛋白，水洗至中性再次離心，將沉淀冷凍干燥即得茶渣蛋白。

3.根據權利要求1所述利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于：所述堿溶酸沉的操作如下：首先將茶渣沸水浴20-30分鐘后紗布過濾得除雜后的茶渣，將除雜后的茶渣與0.06-0.1mol/L?NaOH以w/v?1：40-60的比例混合進行堿提，提取時間40-60min，溫度80-90℃，提取后用紗布過濾，濾液為堿提的茶渣蛋白溶液，用鹽酸調節堿提的茶渣蛋白溶液pH至3-4進行蛋白沉淀，離心得沉淀蛋白，水洗至中性再次離心，將沉淀冷凍干燥即得茶渣蛋白。

4.根據權利要求2所述利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于：所述離心得沉淀蛋白中的離心條件是4000?r/min，4-10℃，離心?10-20min。

5.根據權利要求1所述利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于將步驟（2）得到的茶渣蛋白多肽復合物溶于蒸餾水中，配成濃度為0.5-2.0mg/mL茶渣蛋白多肽復合物溶液。

6.根據權利要求1所述利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于步驟（2）中，所述酶解的具體操作如下：將茶渣蛋白溶解在水中使蛋白質量濃度達0.5-5.5%，調節pH至7.0-7.5，溫度保持在50-55℃，加入Protamex蛋白酶2000～8000U/g茶渣蛋白，水解20-50min，水解度控制在8-10%，滅酶，冷凍干燥，得到茶渣蛋白多肽復合物。

7.根據權利要求1所述利用廢棄茶渣制備抗氧化肽的方法，其特征在于步驟（2）中所述滅酶的操作為：酶解反應結束后，在沸水浴10min滅酶。?