[發明專利]人源化抗表皮生長因子受體抗體及其用途

有效

• 申請號: 201210406288.3
• 申請日: 2012-10-17
• 公開（公告）號: CN103772504A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 劉劼
• 申請（專利權）人: 上海津曼特生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;A61K39/395;A61K48/00;A61P35/00;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李帆

技術領域

本發明涉及人源化抗體，具體涉及人源化抗表皮生長因子受體抗體，本發明還涉及所述抗體在制備預防或治療與表皮生長因子高活性或高表達相關疾病的藥物中的用途。與人鼠嵌合抗體相比，本發明所涉及的人源化抗表皮生長因子抗體進一步降低了抗體的免疫原性，同時增強了其抗原識別活性和體內體外抗瘤功能，有更好的臨床應用前景。

背景技術

表皮生長因子受體(Epidermal?Growth?Factor?Receptor，EGFR，也稱為HER1，c-ErbB1)是表皮生長因子家族的細胞表面受體，是由1186個氨基酸殘基構成，分子量為170kD的一種跨膜糖蛋白(Jorissen?RN，Walker?F，Pouliot?N，et?al.Epidermal?growth?factor?receptor：mechanisms?of?activation?and?signaling.Exp?Cell?Res，2003；284：31-53)。EGFR屬于I型酪氨酸激酶受體ErbB亞族(ErbB?1-4)，具有酪氨酸激酶的活性。EGFR穩定的表達于許多上皮組織，包括皮膚和毛囊。表皮生長因子受體異常表達或因受體突變而活化會導致癌變。有很多實體瘤發現高表達表皮生長因子受體，如直結腸癌、頭頸部癌、肺癌、卵巢癌、宮頸癌、膀胱癌和食管癌等(Olayioye?MA，Neve?RM，Lane?HA，et?al.The?EerbB?Signaling?network：receptor?heterodimerzation?in?development?and?cancer.The?EMBO?J，2000；19：3159-3167)。轉化生長因子α和表皮生長因子等生長因子是表皮生長因子受體的內源性配體。這些配體與表皮生長因子受體結合，激活受體胞內酪氨酸蛋白激酶的活性，啟動下游多條信號轉導途徑，從而調節正常細胞的生長和分化，增加腫瘤細胞的侵襲力、促進血管生成、抑制腫瘤細胞的凋亡(Ciardiello?F，Tortora?G.A?novel?approach?in?the?treatment?of?cancer：targeting?the?epidermal?growth?factor?receptor.Clin?Cancer?Res，2001；7：2958-2970)。表皮生長因子受體在腫瘤中的高度表達及其在腫瘤細胞生長、分化中起重要作用的這些特點，使表皮生長因子受體成為具有良好前景的腫瘤治療靶點。

抗表皮生長因子受體的治療性抗體，最早來自由表皮生長因子受體高表達表皮癌A431免疫小鼠而得到的鼠源抗體M225。M225與表皮生長因子受體特異結合，阻斷其與配體結合，從而抑制表皮生長因子受體酪氨酸蛋白激酶的活性(Goldstein?et?al，1995，Clin.Cancer.Res.1：1311-1318)。鼠源抗體作為外源蛋白，反復刺激人體，可引起超敏反應，被稱為人抗鼠抗體反應。鼠源抗體在體內可能被抗抗體中和，進而被快速清除，甚至導致嚴重的過敏反應而致死。另外，鼠源單克隆抗體缺乏人抗體具有的免疫效應功能，如抗體依賴細胞介導的細胞毒(ADCC)和補體依賴的細胞毒(CDC)作用，因而療效不佳。因此人鼠嵌合抗體C225抗體(愛必妥，Erbitux或Cetuximab，ImClone(現在Eli?Lilly)公司)采用人IgG1κ和鼠抗M225的可變區，降低了鼠源單抗的免疫原性，保留了與表皮生長因子受體的特異親和性，可阻斷EGF和TGFa等配體與表皮生長因子受體的結合，抑制其磷酸化和下游信號傳導，從而抑制腫瘤細胞的生長，誘導凋亡，減少基質金屬蛋白酶和血管上皮生長因子的產生。2004年美國FDA批準愛必妥治療結直腸癌，2006批準治療頭頸部癌，目前有更多臨床試驗用于其它腫瘤適應癥。與其他化療藥相比，抗體藥物特異性強，副作用小，在臨床上取得了較好的療效。然而，人鼠嵌合愛必妥單抗仍有免疫原性，臨床報道其免疫原性為5％，容易產生人抗抗體反應而導致免疫復合物介導的抗體清除，和皮膚及粘膜的副作用(An?Z，et?al.，2009，Therapeutic?Monoclonal?Antibody，p313)。