[發(fā)明專利]一種具有促血管新生作用的中藥提取物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210405699.0
• 申請(qǐng)日: 2012-10-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102861123A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 封衛(wèi)毅;肖志強(qiáng);魏友霞;楊建剛;董海燕;孟祥海;郭晨;倪亞會(huì)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西新藥技術(shù)開(kāi)發(fā)中心
• 主分類號(hào): A61K36/481
• 分類號(hào): A61K36/481;A61P9/10;A61P9/00;A61P17/02;A61P9/14;A61P3/10;A61P19/08
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 汪人和

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物藥用活性成分技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種具有促血管新生作用的中藥提取物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

血管新生是指在原有毛細(xì)血管基礎(chǔ)上通過(guò)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與遷移，從先前存在的血管處生成新的毛細(xì)血管的過(guò)程。血管新生在胚胎發(fā)育、創(chuàng)傷愈合、子宮內(nèi)膜周期性增殖、腫瘤、增殖性視網(wǎng)膜病變等生理、病理狀態(tài)中起著重要作用。調(diào)節(jié)機(jī)體血管新生的失衡過(guò)程，已成為某些疾病治療的新策略。通過(guò)促進(jìn)血管新生，可治療許多存在血管新生不足性疾病，如冠心病、創(chuàng)傷和骨折延遲愈合、閉塞性脈管炎等。由于目前尚未有促進(jìn)血管新生的有效治療藥物，因此從中藥及經(jīng)典復(fù)方中篩選提取是新藥研究的重要途徑。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決的問(wèn)題在于提供一種具有促血管新生作用的中藥提取物及其制備方法和應(yīng)用，是從中藥經(jīng)典名方當(dāng)歸補(bǔ)血湯中跟蹤提取篩選得到有效部位，可應(yīng)用于促血管形成和/或新生。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：

一種具有促血管新生作用的中藥提取物，該中藥提取物的提取原料藥為黃芪和當(dāng)歸，其提取是將黃芪和當(dāng)歸按質(zhì)量比為5:1混合，經(jīng)水提醇沉后回收乙醇所得的濃縮液上樣于大孔吸附樹(shù)脂，用水洗脫至流出液無(wú)色后再用體積濃度30～90%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫餾分后回收乙醇，然后用有機(jī)溶劑萃取，再將有機(jī)溶劑萃取液回收溶劑后進(jìn)行固定相層析分離，收集流動(dòng)相洗脫所得餾分后干燥，得到當(dāng)歸補(bǔ)血湯有效部位。

所述中藥提取物以黃芪甲苷、阿魏酸和毛蕊異黃酮苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，所含黃芪甲苷不少于5%、所含阿魏酸不少于2%、所含毛蕊異黃酮苷不少于2%。

一種具有促血管新生作用的中藥提取物的制備方法，包括以下步驟：將黃芪和當(dāng)歸按質(zhì)量比為5:1混合，經(jīng)水提醇沉后回收乙醇所得的濃縮液上樣于大孔吸附樹(shù)脂，用水洗脫至流出液無(wú)色后再體積濃度30～90%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫餾分后回收乙醇，然后用有機(jī)溶劑萃取，再將有機(jī)溶劑萃取液回收溶劑后進(jìn)行固定相層析分離，收集流動(dòng)相洗脫所得餾分后干燥，得到當(dāng)歸補(bǔ)血湯有效部位。

所述的具有促血管新生作用的中藥提取物的制備方法，包括以下步驟：

1）將黃芪和當(dāng)歸按質(zhì)量比為5:1分別粉碎后混合，用水浸泡后，煎煮提取或加熱回流提取，提取完成后收集提取液，減壓濃縮得到濃縮液；濃縮液加乙醇至含醇體積濃度達(dá)10～95%，攪拌均勻后常溫或冷藏條件下靜置，待沉淀完全后過(guò)濾得上清液，上清液回收乙醇至無(wú)味，得到醇沉液；

2）將醇沉液回收乙醇所得的濃縮液上樣于大孔吸附樹(shù)脂，先用水洗脫至流出液無(wú)色，然后再用體積濃度30～90%的乙醇溶液洗脫，收集洗脫餾分，回收洗脫餾分中的乙醇，得到二次濃縮液；

3）將二次濃縮液加水充分?jǐn)嚢韬蠹尤胗袡C(jī)溶劑萃取，分離有機(jī)相提取液并濃縮回收溶劑，得到三次濃縮液；

4）三次濃縮液進(jìn)行固定相層析分離，固定相為非極性固定相或三氧化二鋁，流動(dòng)相為水和與水互溶的有機(jī)溶劑的混合液，三次濃縮液上樣于固定相后經(jīng)流動(dòng)相洗脫，收集洗脫餾分，真空或常溫干燥后得到粉狀的具有促血管新生作用的中藥提取物。

所述的將黃芪和當(dāng)歸粉碎混合后，用其質(zhì)量5～10倍的水浸泡1～5h后，煎煮提取1.5～5h或加熱回流提取1～5h，提取完成后收集提取液，減壓濃縮得到濃縮液；

所述的大孔吸附樹(shù)脂為D-101、HPD722、AB-8、DA-201、DS401、DM-301、HPD-100、DM130或H-103，用水洗至無(wú)色后再用體積濃度為30～90%的乙醇溶液洗脫，洗脫的流速為1.0～2.0ml/min，收集醇洗脫液；

所述的萃取的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、氯仿或正丁醇；

所述的非極性固定相為C18、C8或大孔硅膠等，所述的與水互溶的有機(jī)溶劑為甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮或四氫呋喃，與水互溶的有機(jī)溶劑的加入以調(diào)節(jié)在固定相中的保留時(shí)間；固定相層析分離流動(dòng)相的流速為1.0～100ml/min。

所述的濃縮液或二次濃縮液的相對(duì)密度為1.06～1.10g/ml，第三次濃縮液的相對(duì)密度為0.90～0.95g/ml；

所述的水與水互溶的有機(jī)溶劑的體積比為85:15～20:80。

所述的具有促血管新生作用的中藥提取物在制備促血管形成和/或新生藥物中的應(yīng)用；

或者在制備改善血管新生不足或低下的藥物的應(yīng)用；

或者在制備調(diào)整機(jī)體或組織的血管新生及狀態(tài)的藥物的應(yīng)用。

所述的藥物包括：

抗心肌缺血、抗腦組織缺血、抗外周組織缺血的藥物；