[發明專利]陽離子型咪唑Gemini表面活性劑[Cn-s-Cnim]Br2在基因轉染中的應用

有效

• 申請號: 201210404508.9
• 申請日: 2012-10-22
• 公開（公告）號: CN102943086A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發明（設計）人: 徐桂英;周亭;楊延蓮;敖明祺;李平;王琛
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 王緒銀

技術領域

本發明涉及陽離子型咪唑Gemini表面活性劑[C_n-s-C_nim]Br₂在基因轉染中的應用，屬于生物醫藥技術領域。?

背景技術

分子生物學的發展使疾病在分子水平上的基因治療成為可能。基因療法的整個過程為目的基因在載體的攜帶下進入細胞內部并實現基因修正和基因置換等，以糾正或補償基因缺陷和異常引起的疾病，或者通過干擾特定基因的表達實現治療的目的等（參見Qasba,P.K.等人，DNA?and?Gene?Therapy:Transfer?of?Mouse?DNA?to?Human?and?Mouse?Embryonic?Cells?byPolyoma?Pseudovirions,Proc.Natl.Acad.Sci.USA?1971,68,2345-2349；以及Xia,H.B.等人，siRNA-mediated?gene?silencing?in?vitro?and?in?vivo,Nat.Biotechnol.2002,20,1006-1010），基因療法的關鍵問題之一便是如何將目的基因導入細胞內部，若單獨采用裸基因進行轉染，基因片段難于被細胞攝取，而且即便裸基因能夠進入細胞內，也會被胞內的核酸酶所降解。因此，尋找理想的基因載體是基因療法所面臨的一大難題。?

目前應用的基因載體可分為兩大類：病毒載體和非病毒載體。病毒載體，主要包括反轉錄病毒、腺病毒和腺相關病毒等，它們轉染效率較高，但由于受到免疫原性、承載DNA能力、細胞靶向性和成本等因素的影響，限制了其應用，參見Luo,D.等人，Synthetic?DNAdelivery?systems,Nat.Biotechnol.2000,18,33-37。非病毒載體，主要是陽離子載體通過其帶正電荷的基團與DNA帶負電荷的磷酸根發生靜電作用，從而減弱DNA鏈上磷酸根負電荷之間的排斥作用,導致DNA彎曲、凝聚,甚至將DNA包載成一定大小的復合物進行傳輸,有關一些合成類物質用于基因轉染的研究已引起人們的廣泛關注。其中,非病毒載體研究較多的幾類為:脂類（參見Felgner,P.L.等,Lipofection:A?highly?efficient,lipid-mediated?DNA-transfectionprocedure,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1987,84,7413-7417）、聚電解質（polyethylenimine聚乙烯亞胺,參見Boussif，O.等人,A?versatile?vector?for?gene?and?oligo-nucleotide?transfer?into?cellsin?culture?and?in?vivo:Polyethyenimine,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1995,92:7297-7301;dendrimers樹枝狀聚合物,參見Nylander,T.等人，DNA?condensation?using?cationicdendrimers-morphology?and?supramolecular?structure?of?formed?aggregates,Soft?Matter?2011,7,4577-4594）、高價陽離子物質（參見Leroux,J.C.等，Gene?delivery?with?bisphosphonate-stabilized?calcium?phosphate?nanoparticles,J.Control.Release?2011,150,87-93）等。盡管有關非病毒基因載體與DNA相互作用的研究受到了重視，但目前常用的陽離子型聚合物作為基因載體的一個很大局限性在于聚合物分子的大小和價態的非均一性，這種非均一性直接導致所制備的載體/DNA結構不同，給生物體內的釋放研究帶來巨大困難。因此，隨著基因療法的不斷發展，需要發展新型的非病毒基因載體，提高載體/DNA結構的均一性，提高基因轉染?的效率，最終提高基因治療的效果。?

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供一種陽離子型咪唑Gemini表面活性劑[C_n-s-C_nim]Br₂在基因轉染中的應用。?