[發(fā)明專(zhuān)利]一種開(kāi)放式培養(yǎng)微藻的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210404147.8
• 申請(qǐng)日: 2012-10-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103773690A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 師文靜;張霖;廖莎;李曉姝;王領(lǐng)民;高大成;吳丹;王崇輝
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)石油化工股份有限公司;中國(guó)石油化工股份有限公司撫順石油化工研究院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/12
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微藻生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種防治敵害生物污染的開(kāi)放式培養(yǎng)微藻的方法。

技術(shù)背景

微藻富含蛋白質(zhì)、多糖、不飽和脂肪酸等營(yíng)養(yǎng)成分（如螺旋藻），可用于食品、醫(yī)藥和能源方面；可以大量積累脂肪酸，有些微藻脂肪酸含量可占干重的30%-60%。利用培養(yǎng)微藻來(lái)積累油脂資源，已經(jīng)成為目前利用太陽(yáng)能開(kāi)發(fā)可再生資源最熱門(mén)的研究領(lǐng)域，不僅具有強(qiáng)大的市場(chǎng)潛力，而且具有非凡的社會(huì)價(jià)值。

目前，微藻培養(yǎng)方式有封閉式和開(kāi)放式兩種。封閉式是指采用不同結(jié)構(gòu)的封閉式反應(yīng)器，如氣升式、攪拌式、管式等，生產(chǎn)成本較高，可用于生產(chǎn)高附加值產(chǎn)物或作為開(kāi)放式培養(yǎng)的種子罐。開(kāi)放式是指采用開(kāi)放池培養(yǎng)裝置，如跑道池、圓形淺池，它具有技術(shù)簡(jiǎn)單、投資低廉的優(yōu)點(diǎn)，因此近年來(lái)備受研究者的關(guān)注。但是，開(kāi)放式培養(yǎng)容易受到絲狀真菌、輪蟲(chóng)、原生動(dòng)物等敵害生物污染，這些敵害生物在藻類(lèi)培養(yǎng)液中生長(zhǎng)、繁殖。當(dāng)這些敵害生物數(shù)量達(dá)到一定的密度時(shí)，即對(duì)培養(yǎng)藻類(lèi)的生長(zhǎng)繁殖造成影響，被污染后的藻液輕者不利于再擴(kuò)大培養(yǎng)，重者會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)的失敗。因此，如何有效地防止敵害生物的污染是微藻規(guī)模化培養(yǎng)的一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題。

近年來(lái)，關(guān)于微藻病蟲(chóng)害等敵害生物防治方法已有許多人做了研究，這方面也有一些報(bào)道。傳統(tǒng)的方法第一是采用物理方法如過(guò)濾或者酸化的方法殺滅和消除藻類(lèi)中的敵害生物。如鄭春波等（鄭春波,于詩(shī)群,姜啟平等.扁藻與金藻類(lèi)生產(chǎn)性培養(yǎng)中敵害生物的防治技術(shù)[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖,2004,?25(3):33）在《扁藻與金藻類(lèi)生產(chǎn)性培養(yǎng)中敵害生物的防治技術(shù)》一文中用過(guò)濾和酸化的方法消除和殺滅藻液中的敵害生物，過(guò)濾的方法比較麻煩，處理不干凈，而且不適用于大規(guī)模養(yǎng)殖，而酸化的方法在殺滅敵害生物的同時(shí)藻本身的生長(zhǎng)也受到了抑制。

其二是通過(guò)化學(xué)的方法來(lái)治理微藻開(kāi)放式培養(yǎng)中的敵害生物污染。如專(zhuān)利CN98113428.9采用向微藻培養(yǎng)池中加入化學(xué)試劑銨鹽（NH₄⁺）來(lái)殺滅雜菌和病蟲(chóng)害等污染物，這種方式的一個(gè)缺點(diǎn)是增加了成本，并且銨鹽的增加會(huì)對(duì)微藻蛋白的后期處理及品質(zhì)產(chǎn)生不利的影響。

其三是采用生物防治的方法來(lái)治理微藻開(kāi)放式培養(yǎng)中的敵害生物污染。在培養(yǎng)過(guò)程中添加抗生素的方法來(lái)抑制敵害生物的污染，如林偉在《幾種海洋微藻無(wú)菌化培養(yǎng)》一文中在微藻培養(yǎng)的指數(shù)生長(zhǎng)期利用青霉素、慶大霉素及卡那霉素組合抗生素來(lái)殺滅雜菌保證藻液免受污染，但這種方法成本不僅比較高，而且在培養(yǎng)幾代后敵害生物也容易產(chǎn)生抗藥性，抗生素也就失去了原有的作用。

其四是采用添加植物提取物的方法來(lái)治理微藻開(kāi)放式培養(yǎng)中的病蟲(chóng)害。如專(zhuān)利CN200610113360.8公開(kāi)了在微藻培養(yǎng)池中添加青蒿藥物提取液，可以有效地抑制纖毛蟲(chóng)的生長(zhǎng)并保證藻體本身生長(zhǎng)不受影響，但是這種藥用提取液比較單一，不能有效地抑制霉菌、酵母等真菌類(lèi)雜菌的污染，僅對(duì)葡萄球菌等細(xì)菌屬原核生物有效，同時(shí)加入青蒿提取液并未有效積累微藻生長(zhǎng)中的油脂含量。

基于以上分析，如何有效地防治敵害生物污染又不會(huì)對(duì)藻液有毒害作用是急需解決的問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種開(kāi)放式培養(yǎng)微藻的方法。該法可以解決微藻開(kāi)放式培養(yǎng)中敵害生物污染問(wèn)題，有效抑制雜菌和防治病蟲(chóng)害污染，同時(shí)具有價(jià)格低廉、安全可靠、并且對(duì)后續(xù)傳代培養(yǎng)不會(huì)產(chǎn)生抗藥性的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明開(kāi)放式培養(yǎng)微藻的方法包括如下內(nèi)容：微藻培養(yǎng)采用常規(guī)培養(yǎng)方法和條件，在微藻培養(yǎng)初始時(shí)，直接在微藻培養(yǎng)基中添加植物提取物，植物提取物為印楝提取物、川楝提取物和苦皮藤提取物中的一種或幾種，添加量為5-80mg/L，優(yōu)選為20-60mg/L。

本發(fā)明中，所述植物提取物中印楝提取物的添加量不超過(guò)30mg/L。

本發(fā)明中，所述微藻為小球藻、小環(huán)藻、柵藻、雨生紅球藻等含油微藻。所用的培養(yǎng)基可以采用本領(lǐng)域常規(guī)的培養(yǎng)基，如可以為普通的SE培養(yǎng)基、D1培養(yǎng)基、Chu10培養(yǎng)基、BBM培養(yǎng)基、BG11培養(yǎng)等淡水培養(yǎng)基或f/2培養(yǎng)基等海水培養(yǎng)基。所述微藻的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度為18-37℃，光照強(qiáng)度為1500lux-10000lux，每天的光照時(shí)間為9-14h，培養(yǎng)周期為7-20天。上述微藻的種類(lèi)、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件等是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的內(nèi)容。

本發(fā)明中，所述印楝提取物為印楝的果實(shí)、種子、油、葉、莖桿和樹(shù)皮中的一種或幾種；川楝提取物為川楝的果實(shí)、葉、莖桿和樹(shù)皮中的一種或幾種；苦皮藤提取物為苦皮騰的根皮、莖皮和葉中的一種或幾種。