[發(fā)明專利]一種鑒定植物遠(yuǎn)緣雜交種中外源染色體和染色體片段的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210402854.3
• 申請日: 2012-10-22
• 公開（公告）號: CN102876801A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡贊民;鄧傳良;符書蘭;韓方普;尹維波;陳宇紅
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 陳曉娜

1.一種利用染色體涂染技術(shù)鑒定植物遠(yuǎn)緣雜交種外源染色體和染色體片段的方法，其包括下述步驟：

1)顯微分離待測植物中的待檢測的染色體的單染色體或染色體片段；

2)利用步驟1)分離的單染色體或染色體片段構(gòu)建單染色體或染色體片段熒光探針；

3)利用步驟2)構(gòu)建的單染色體或染色體片段熒光探針對雜交種中期分裂相染色體進(jìn)行熒光原位雜交；和

4)分析步驟3)得到的熒光原位雜交結(jié)果，確定待測植物中所述待檢測的染色體的熒光信號分布。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟1)通過制備植物遠(yuǎn)緣雜交種根尖中期分裂相，利用單染色體顯微分離技術(shù)分離待檢測的染色體的單染色體或染色體片段。

3.權(quán)利要求1所述的方法，其中步驟2)通過對步驟1)分離的單染色體或染色體片段進(jìn)行DOP-PCR擴(kuò)增，借助切口平移方法對所述分離的單染色體或染色體片段DOP-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行熒光探針構(gòu)建。

4.權(quán)利要求3所述的方法，其中步驟2)對微分離的單染色體進(jìn)行兩輪DOP-PCR擴(kuò)增。

5.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述植物為單子葉植物或雙子葉植物。

6.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述單子葉植物為禾本科植物。

7.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述植物選自小麥、黑麥、中間偃麥草-小麥附加系TAI-27、長穗偃麥草-小麥附加系7ES/CS。

8.權(quán)利要求7所述的方法，其中所述待檢測的染色體和染色體片段選自黑麥1R染色體、中間偃麥草-小麥附加系TAI-27附加染色體、長穗偃麥草-小麥附加系7ES/CS附加染色體。