[發(fā)明專利]一種精確、快速和微量檢測人血清中抗原和抗體的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210401974.1
• 申請日: 2012-10-22
• 公開（公告）號: CN102879560A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周勝利;胡當玉;周凝
• 申請（專利權(quán)）人: 周勝利
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種精確、快速和微量檢測人血清中抗原和抗體的方法，其特征是，采用微量(微升)檢測板(30，60，72或其它孔微量(微升)檢測板)應用紅細胞凝集的方法去測定存在于人體體液的特異性抗原或抗體；

其中，所述方法可分別為：

以正向紅細胞凝集的步驟檢測紅細胞膜上的抗原的方法；

以反向紅細胞凝集的步驟檢測人體內(nèi)抗紅細胞膜上的抗體的方法；

以間接血凝的步驟測定存在于人體體液的特異性抗體的方法；

以反向間接血凝的步驟測定存在于人體體液的特異性抗原的方法；

并且，所述方法中采用的微量(微升)板中的抗紅細胞抗原抗體或吸附或交聯(lián)抗體可以是多克隆抗體，也可以是單克隆抗體，還可以是液狀抗體，還可以是干燥粉狀抗體；所述方法中采用的微量(微升)板中的紅細胞可以是新鮮紅細胞，也可以是經(jīng)醛化、鞣酸處理的冰凍紅細胞，還可以是冷凍干燥紅細胞粉劑，還可以是紅細胞膜；

并且，在所述微量(微升)板中每個孔內(nèi)加入微量(微升)已知單克隆或多克隆抗紅細胞抗原的抗體，用于檢測每個人的像A，B，O；Rh等抗原系統(tǒng)的紅細胞抗原，而制備成各種系列型紅細胞抗原檢測盒的方法也稱為正向紅細胞凝集實驗；

并且，在所述微量(微升)檢測板預先放入孔內(nèi)微量(微升)已知單克隆或多克隆抗紅細胞抗原的抗體用于檢測紅細胞抗原，制備成各種系列型紅細胞抗體檢測盒，用于測定紅細胞抗原，也稱為反向紅細胞配型；

并且，在所述微量(微升)板中每個孔內(nèi)加入微量(微升)吸附或交聯(lián)的已知單克隆或多克隆抗體，用于檢測人的病毒，腫瘤，自體免疫性疾病等，制備成各種系列型抗原檢測盒，這種方法也稱為紅細胞反向間接凝集實驗；

并且，在微量(微升)版中每個孔內(nèi)加入微量(微升)吸附或交聯(lián)的已知的抗原，用于檢測人的病毒，腫瘤，自體免疫性疾病等抗體，制備成各種系列型抗體檢測盒，這種方法也稱為紅細胞間接凝集實驗；

并且，采用所述30，60或72孔微量(微升)檢測板檢測紅細胞膜表面抗原，用于檢測每個人不止是像A，B，O；Rh等抗原系統(tǒng)的紅細胞表型抗原(Phenotype)，而且還包括P，MNS，Kell，Luthern，Kell，Duffy和Kidd等紅細胞系統(tǒng)，以及任何其它有關(guān)的紅細胞系統(tǒng)，制備成用于檢測每個人的紅細胞表型抗原(Phenotype)抗原檢測盒。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的精確、快速和微量檢測人血清中抗原和抗體方法，其特征是，所述用來檢測人血清內(nèi)的抗紅細胞抗體或紅細胞抗原系統(tǒng)所采用的方法可以是抗體和抗原直接的免疫反應所引起的紅細胞凝集現(xiàn)象的直接反應；也可以是抗體和抗原在攝氏37度或攝氏4度孵育一定時間15或30分鐘以后，洗去多余的抗體和抗原，加入像抗人免疫球蛋白這樣的第二抗體，從而產(chǎn)生的間接的免疫反應的紅細胞凝集現(xiàn)象的抗體或抗原的間接反應。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的精確、快速和微量檢測人血清中抗原和抗體方法，其特征是，所述的檢測板可以是供臨床或血庫應用的反向紅細胞檢測板，其步驟是，在所述檢測板中加入1微升新鮮紅細胞、冷凍干燥紅細胞粉劑或紅細胞膜蛋白和5微升礦物油放于深低溫冰箱存放，并以干冰保存運輸給臨床檢驗或血庫應用；同理，所述的檢測板可以供臨床檢驗或血庫應用的各種正向紅細胞檢測板、間接血凝板或反向血凝板，其步驟是，在所述檢測板中加入1微升新鮮紅細胞經(jīng)醛化、鞣酸處理且吸附單克隆或多克隆抗體紅細胞或冷凍干燥紅細胞并與5微升礦物油放于深低溫冰箱存放，并以干冰保存運輸給臨床檢驗或血庫應用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的精確、快速和微量檢測人血清中抗原和抗體方法，其特征是，所述方法中采用微量(微升)血量判斷血型抗原或抗體，其步驟是，將檢測者通過靜脈或手指、耳垂的從末梢血管收集全血，經(jīng)離心機后分離血清和紅細胞，將紅細胞用正常生理鹽水稀釋到1％到3％，取出1微升稀釋的紅細胞加入到微量(微升)檢測板的孔中，以離心速度在300到1000rpm之間再離心30秒到1分鐘，然后用吹風或搖晃打散離心后的紅細胞，此后，用微量(微升)檢測板直接用顯微鏡觀察結(jié)果；根據(jù)紅細胞凝集的程度，對凝集結(jié)果打分，從0加號到4個加號；0加號為沒有紅細胞凝集，為陰性反應，不存在相應的抗原；而4個加號為強陽性，存在相應的抗原。