[發明專利]一種用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法

無效

• 申請號: 201210400907.8
• 申請日: 2012-10-19
• 公開（公告）號: CN102942248A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發明（設計）人: 楊縝;徐大友
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: C02F3/00
• 分類號: C02F3/00;C12N11/00;C02F101/34
• 代理公司: 深圳市恒申知識產權事務所(普通合伙) 44312
• 代理人: 陳健

1.一種用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法,其特征在于，所述方法是利用一種酚類污染物處理劑處理酚類污染物，所述酚類污染物處理劑含有無載體固定化酪氨酸酶，所述酚類污染物含有酚類化合物，所述酚類污染物處理劑利用所述無載體固定化酪氨酸酶將所述酚類化合物催化反應生成對應的醌類化合物，以去除所述酚類化合物。

2.如權利要求1所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述酚類化合物包括如下化合物中的一種或多種：苯酚、甲基酚、硝基酚、對氯苯酚、壬基酚、辛基酚、氨基酚及雙酚A。

3.如權利要求1所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述方法還包括如下步驟：

利用高效液相色譜法檢測所述酚類化合物的殘留情況以及處理率。

4.如權利要求1所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述方法還包括如下步驟：

利用水螅對經所述方法處理后的酚類污染物的毒性進行檢測。

5.如權利要求1所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，制備所述無載體固定化酪氨酸酶的方法包括如下步驟：

獲取酪氨酸酶酶液；

室溫下對所述酪氨酸酶酶液進行攪拌并加入硫酸銨固體，使所述酪氨酸酶酶液的硫酸銨飽和度在0℃時達到50%，并進行沉淀反應10分鐘，以獲取部分沉淀的酪氨酸酶酶液；

將重量比為12.5%的戊二醛逐滴加入所述部分沉淀的酪氨酸酶酶液中，并在4℃下攪拌反應以獲取交聯懸濁液，其中，所述12.5%的戊二醛與所述酪氨酸酶酶液的體積比為1:50；

將所述交聯懸濁液離心并獲取不溶于水的顆粒，用磷酸緩沖液清洗所述顆粒至少一次，所述顆粒即為無載體固定化酪氨酸酶；

將清洗后的所述顆粒冷凍干燥后并研磨粉碎以獲取粉末狀的無載體固定化酪氨酸酶。

6.如權利要求5所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述獲取酪氨酸酶酶液的步驟包括如下步驟：

將酪氨酸酶原料物與摩爾濃度為50毫摩爾每升，pH值為6.0的磷酸緩沖液混合搗碎得到混合液，將所述混合液過濾并獲取濾液；

將所述濾液低溫冷藏，以獲取活性較高的酪氨酸酶粗提液；

將所述酪氨酸酶粗提液進行低溫離心并去除沉淀，以獲取所述酪氨酸酶酶液。

7.如權利要求6所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述將濾液低溫冷藏的步驟包括：

將所述濾液置于-20℃的冰箱中保存至少1個月。

8.如權利要求6所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述酪氨酸酶原料物包括如下物質的一種或多種：馬鈴薯、香蕉、蘋果、山芋、芋艿、蠶豆及蘑菇。

9.如權利要求5所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述4℃下攪拌反應的時間為16小時。

10.如權利要求5所述的用無載體固定化酶去除酚類污染物的方法，其特征在于，所述用磷酸緩沖液清洗顆粒的步驟包括：

用摩爾濃度為50毫摩爾每升，pH值為6.0的磷酸緩沖液清洗所述顆粒。