[發明專利]一種利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝

有效

• 申請號: 201210399174.0
• 申請日: 2012-10-19
• 公開（公告）號: CN102875697A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 謝成君;李鑫
• 申請（專利權）人: 山東紳聯生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 張貴賓

（一）????????技術領域

本發明涉及一種從豬小腸粘膜中分離生化藥物的工藝，特別涉及一種利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝。

（二）????????背景技術

肝素是一種廣泛存在于哺乳動物組織中的黏多糖，主要存在于肥大細胞中，具有抗凝血作用，被廣泛用于手術和腦血栓、心肌梗塞等的治療。肝素的分子量大約3000—37500。肝素鈉是肝素的鈉鹽。肝素鈉作為天然抗凝血物質受到世界各國的重視．也是我國主要的出口藥物之一．隨著研究的深入，人們發現肝素鈉不但有抗凝、抗血栓形成和調節血脂的作用，還具有抗炎、抗過敏、抗病毒、抗癌等功能。豬小腸是肝素鈉的重要來源之一，但是傳統生產工藝在酶解時一次性加鹽，如果加鹽不超過3%，不能提升溶液中鈉離子含量，肝素鈉生成結合率低；如果加鹽超過3%，則細胞分解時發生鹽析作用，肝素析出率低，且樹脂在高鹽濃度下吸附率低，肝素鈉產率低，肝素鈉產品質量不穩定。

（三）????????發明內容

本發明為了彌補現有生產技術的不足，解決了酶解和吸附過程中對鹽度要求不同的矛盾，提供了一種利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝，本發明肝素解離完全，肝素與鈉離子結合率高，吸附率高，并實現了吸附時分解液快速降溫防止肝素酶快速裂解肝素鈉，收率高，肝素鈉活性損失小，質量穩定。

本發明是通過如下技術方案實現的：?

一種利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝，其特殊之處在于：其包括以下步驟（1）酶解：將豬小腸中粘膜取出，與水一起置于酶解罐中，粘膜與水的重量比為1:7-9，攪拌均勻后加入蛋白酶調節所得料液的pH值為8-9，加熱至溫度為55-58℃，然后加入腸衣專用鹽至料液的鹽度為2.2%-2.5%，保溫1-3h，再加入腸衣專用鹽至料液的鹽度為4.5%-5.0%，保溫0.2-1h，繼續加熱使溫度達到80-85℃，保溫20-50min后，過80目膜過濾，收集過濾液；

（2）吸附：將上述所得過濾液加入吸附罐中，攪拌，然后加水至鹽度為2.2%-2.5%，溫度為55-58℃，再加入樹脂，攪拌8-10h，過濾，放出廢液，收集過濾樹脂；

（3）洗脫、沉淀脫鹽、脫水：將過濾后所得的樹脂經洗脫、沉脫鹽淀、脫水干燥制得肝素鈉。???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

本發明的利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝，步驟（1）中，添加堿性蛋白酶，該堿性蛋白酶與酶解中粘膜的重量比為1：500，用尼龍布過濾，收集過濾液，其中堿性蛋白酶屬于一種絲氨酸脆外高堿性蛋白酶，它能水解蛋白質分子肽鏈生成多肽或氨基酸，具有較強的分解蛋白質的能力。

本發明的利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝，步驟（2）中樹脂的添加量按每根豬小腸加入20-30g樹脂的比例添加。

本發明的利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝，步驟（3）中，

洗脫：

（a）：反復沖洗過濾后的樹脂；將沖洗干凈的樹脂倒入洗脫器中，加入質量分數為5%-7%的鹽水，溫度保持在40-60℃，開啟攪拌機轉速為20-40r/min，攪拌10-60min；

（b）：隨后將廢液倒掉，加入質量分數為15%-30%的鹽水，溫度保持在40-60℃，開啟攪拌機轉速20-40r/min，攪拌2-4h后，收集洗脫液；

（c）：重復步驟（b），將兩次收集的洗脫液合并待用；

（d）：步驟（c）收集完洗脫液后，再接著加入質量分數為15%-30%的鹽水，溫度保持在40-60℃，開啟攪拌機轉速20-40r/min，攪拌10-60min后，收集洗脫液做高濃度鹽水循環使用。

沉淀脫鹽：

將洗脫液過濾移入沉淀罐中，邊攪拌邊加入質量分數為80%-85%的乙醇，乙醇與洗脫液的體積比為1.8-2.2:1，攪勻密封沉淀20-30h，收集沉淀物待用；

脫水：將收集的沉淀物濾干脫水；將脫水后的沉淀物移入烘箱在80-90℃下烘干6-8h即得肝素鈉。

本發明的利用豬小腸高效提取肝素鈉的工藝，所述的鹽水是由腸衣專用鹽加水配制而成。