[發明專利]具有寬廣pH活性纖維素酶及其制備方法無效
| 申請號: | 201210396001.3 | 申請日: | 2012-10-17 |
| 公開(公告)號: | CN102911952A | 公開(公告)日: | 2013-02-06 |
| 發明(設計)人: | 魏東芝;王瑋;趙喜華 | 申請(專利權)人: | 華東理工大學 |
| 主分類號: | C12N15/56 | 分類號: | C12N15/56;C12N9/42;C12N15/63;C12R1/645 |
| 代理公司: | 上海科盛知識產權代理有限公司 31225 | 代理人: | 楊元焱 |
| 地址: | 200237 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 具有 寬廣 ph 活性 纖維素酶 及其 制備 方法 | ||
1.一種具有寬廣pH活性纖維素酶基因,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.根據權利要求1所述具有寬廣pH活性纖維素酶基因,其特征在于:所述的纖維素酶基因編碼的多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。
3.一種根據權利要求1所述的纖維素酶基因的編碼多肽,其特征在于:其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。
4.根據權利要求3所述的編碼多肽,其特征在于:所述的編碼多肽在pH6-10條件下具有75%以上的纖維素酶相對活性,并且能在pH3-10保存下具有90%以上的殘余相對活性。
5.一種具有寬廣pH活性纖維素酶的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)由深海真菌Phaeosphaeria?sp.LH21培養分離出具有寬廣pH活性纖維素酶基因,該基因具有SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列;
2)將基因克隆到表達載體pPIC9K中;
3)將構建的表達載體轉入到宿主細胞,生產具有寬廣pH活性纖維素酶的基因工程菌;
4)培養基因工程菌,獲得具有寬廣pH活性纖維素酶。
6.根據權利要求5所述具有寬廣pH活性纖維素酶的制備方法,其特征在于,所述宿主細胞為原核細胞或真核細胞,原核細胞包括大腸桿菌、枯草桿菌、鏈霉菌、或分支桿菌;真核細胞包括酵母細胞、里氏木霉、黑曲霉、米曲霉或各種動植物細胞。
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