[發(fā)明專利]抗骨橋蛋白抗體

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210395068.5
• 申請日: 2012-10-17
• 公開（公告）號: CN102942630A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 華紹炳;侯偉
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州德同生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K16/24
• 分類號: C07K16/24;C12N15/11;G01N33/574
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抗體，尤其涉及一種抗骨橋蛋白抗體。

背景技術(shù)

骨橋蛋白(osteopontin，OPN)是一種分泌型磷酸化糖蛋白，在多種腔上皮，如消化道黏膜中有少量表達，可參與細胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進細胞黏附和遷移。Senger等于1979年首次在惡性轉(zhuǎn)化的上皮細胞株中發(fā)現(xiàn)，稱之為轉(zhuǎn)化相關(guān)性磷酸蛋白。1986年，F(xiàn)ranzen等從骨組織中分離出一種磷蛋白，其特性與Senger等發(fā)現(xiàn)的磷蛋白相似，正式將其命名為骨橋蛋白。

骨橋蛋白也是一種非常重要的致炎癥細胞因子，由巨噬細胞、樹突狀細胞、角質(zhì)化細胞與上皮細胞產(chǎn)生。它屬于4-α-螺旋束細胞因子家族。骨橋蛋白能夠活化多種免疫細胞、刺激它們增殖并延長其壽命。近年來對骨橋蛋白與腫瘤的關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，骨橋蛋白的過度表達與人類多種腫瘤，如卵巢癌、肺癌、乳腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、食管癌、肝癌等腫瘤細胞生長、增殖和侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

卵巢癌是婦科常見三大惡性腫瘤之一，其病死率位列婦科三大惡性腫瘤之首。因早期時缺乏典型癥狀，無創(chuàng)檢查不易發(fā)現(xiàn)其早期病變，故多數(shù)病例發(fā)現(xiàn)時已屬晚期。卵巢癌III期及IV期患者的5年生存率不到20％，而I期患者的5年生存率可90％。臨床上普遍采用的糖類抗原CA125。然而，僅50％左右早期至I期和II期的卵巢癌病患血清中能檢測到CA125的高表達(Coticchia等，“Ovarian?cancer?biomarkers：Current?options?and?future?promise.”《J?Natl?Compr?Cancer?Network》2008年第6卷8期)。

骨橋蛋白不僅在卵巢癌及卵巢交界性惡性腫瘤組織中的表達高于在良性腫瘤和正常卵巢上皮組織，而且晚期卵巢癌組織中的表達也明顯高于早期癌，在有癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中同樣高表達。OPN的血清學(xué)檢查不僅可以用于區(qū)別健康人群和卵巢癌患者，還可用于區(qū)分卵巢癌和卵巢良性腫瘤。OPN與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測時可以提高卵巢癌的檢出率(Dutta等，“Biomarkers?for?ovarian?cancer?detection?and?therapy.”《Cancer?Biol?&Therapy》2010年第9卷9期)。

馬哲和張虹(“骨橋蛋白在卵巢癌組織中的表達及意義。”《現(xiàn)代診斷與治療》2011年第22卷3期)采用免疫組化法檢測35例上皮性卵巢癌組織、17例交界性卵巢腫瘤、15例卵巢良性腫瘤組織及6例正常卵巢組織標(biāo)本中OPN的表達，分析其與臨床病理特征的關(guān)系及相關(guān)性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)OPN在上皮性卵巢癌、交界性卵巢腫瘤、卵巢良性腫瘤及正常卵巢組織中陽性表達率分別為69％、65％、26％及0％。因此，OPN在卵巢癌組織中顯著高表達；其表達和術(shù)前血CA125水平相關(guān)，足卵巢癌早期診斷、病情監(jiān)測及評價預(yù)后的生物標(biāo)志物之一。

骨橋蛋白在肺癌病患血清中也有高表達，血清OPN檢測在肺癌患者臨床診療中同樣有應(yīng)用價值。董淑敏等(“肺癌患者外周血骨橋蛋白檢測的臨床意義”《現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志》2008年24期)選擇不同臨床TNM分期的肺癌患者120例作為肺癌組，同期肺炎性假瘤患者23例作為疾病對照組，49例門診體檢正常者作為健康對照組，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)進行血清骨橋蛋白水平檢測。同時對其中67例臨床治療有效的肺癌患者行治療前后(放化療或手術(shù)前后)該腫瘤標(biāo)志物血清水平比較。結(jié)果血清骨橋蛋白水平在I～II期患者中為(73.7±32.9)μg/L，在III期患者中為(144.6±44.7)μg/L，在IV期患者中則可達(395.8±105.2)μg/L。說明骨橋蛋白血清水平是一個較好的評價肺癌進展程度的血清學(xué)指標(biāo)，且有助于臨床對肺癌臨床療效的評判。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種特異性高的抗骨橋蛋白抗體。

一種抗骨橋蛋白抗體，包括重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)的三個高變區(qū)CDRH1、CDRH2、CDRH3的氨基酸序列分別為：GGSFSGYYW、IYYSGSTYYNPSLKS、HDYYDFWSGYYDAFDI，所述輕鏈可變區(qū)的三個高變區(qū)CDRL1、CDRL2、CDRL3的氨基酸序列分別為：TGSSSDVGDYYYVS、DVNYRPS、SSYRDTQILG。

所述重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

所述輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

所述抗骨橋蛋白抗體可以是全抗體、抗體片段或單鏈抗體。