[發明專利]短小芽孢桿菌及其在防控水產霍亂弧菌中的應用

無效

• 申請號: 201210393692.1
• 申請日: 2012-10-17
• 公開（公告）號: CN102994417A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 陳文怡;張元柱
• 申請（專利權）人: 蘇州市水生動物疫病預防控制中心
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/07
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 范晴

技術領域

本發明涉及一株短小芽孢桿菌、其制劑及其在防控水產霍亂弧菌中的應用，屬于漁業生態安全和水產品衛生安全領域，用于改善漁業水質，抑殺水產養殖系統中的霍亂弧菌。?

背景技術

霍亂弧菌(VC)是引起人烈性傳染病霍亂的病原體，在我國被列為甲類傳染病，國際上被列為檢疫傳染病。霍亂弧菌的自然棲息地是水體生態系統，它是在水環境中土生土長的，是水生動物、浮游生物的共棲體。它以水生動物的甲殼質為營養基質，具嗜溫、嗜堿、嗜營養鹽的特性，能產生毒素使人致霍亂病；能分泌甲殼質酶腐蝕某些水生動物（甲魚、蝦、蟹、貝及浮游甲殼類等）的甲殼，破壞其保護層，引發疾病；能轉化硝酸鹽為有毒的亞硝酸鹽使水質敗壞，危害養殖對象。?

人類霍亂是經口感染的腸道傳染病，主要經水、食物等而傳播，正常人食入霍亂弧菌量超過10^8-9均可發病；霍亂自流行區向外擴散，主是通過水體與食品的污染以及病人與帶菌者的擴散而實現，隨著安全飲用水的普及，食物型（主要是水產品，尤其是甲魚產品）傳播日趨突出。?

目前，國內外對甲魚等水產品攜帶霍亂弧菌的防疫尚處于對其苗種和產品檢疫防疫階段，但往往防不勝防。因為其養殖水體中滋生的病菌，不僅污染水產品，也對周圍環境造成污染，擴大傳播途徑，增加霍亂流行風險。而且，一旦發現養殖水體或水產品霍亂弧菌檢測陽性，政府需要立即采取緊急措施予以控制，一般采用化學藥物對染疫水體及周邊環境進行全面徹底消毒，撲殺、銷毀染疫水體中所有水產品，同時需支付巨額疫病防控補償。這樣不僅造成極大的經濟損失，也會對環境造成嚴重的藥物污染或次生災害。因此，能否在水產品上市之前，通過無公害的生物預防方法，在養殖生產環節使霍亂弧菌得到消除，切斷其傳播源，是杜絕水產品衛生安全隱患的關鍵所在和理想途徑，也是國內外亟需攻克的重要課題。通過尋求拮抗菌以消除水產養殖系統中的霍亂弧菌，目前國內外尚未見有關研究報道。?

發明內容

本發明目的在于提供一種短小芽孢桿菌AB3（Bacillus?pumilus?AB3），該菌株可以以拮抗菌的作用有效的消除水產養殖系統中的霍亂弧菌，解決了現有技術中水產品攜帶霍亂弧菌的防疫問題。?

為了解決現有技術中的這些問題，本發明提供的技術方案是：?

一種短小芽孢桿菌AB3（Bacillus?pumilus?AB3），其保藏編號為CGMCCNO:6408，其具有抑制霍亂弧菌生長或繁殖的能力。?

本發明的另一目的在于提供一種霍亂弧菌拮抗菌制劑，其特征在于所述制劑包括藥學上有效量的所述的短小芽孢桿菌AB3（Bacillus?pumilus?AB3）。?

本發明的又一目的在于提供一種所述的微生態霍亂弧菌抑菌制劑在水產品養殖系統中霍亂弧菌抑制方面的應用。?

所述的霍亂弧菌選自人類霍亂以及甲魚、蝦類、蟹類和貝類的甲殼腐爛癥的病原菌。?

使用的微生物：?

使用的短小芽孢桿菌菌株，自市場購買的漁用微生態制劑，經分離培養和抑菌篩選得到，菌株代號為AB3。此菌經鑒定，其屬于短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）的成員，命名為短小芽孢桿菌AB3（Bacillus?pumilus?AB3），簡稱BPAB3，現在已經保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC?NO:6408，保藏日期為2012年8月10日，為霍亂弧菌拮抗菌菌株。短小芽孢桿菌（Bacillus?pumilus）是一種飼用微生物菌種，適用于豬、禽類、反芻動物和魚、蝦等水產動物，可用于防治小麥根腐病、草莓灰霉病。?

短小芽孢桿菌AB3（Bacillus?pumilus?AB3）的生物學特性：?

短小芽孢桿菌AB3（Bacillus?pumilus?AB3），菌體呈桿狀，圓末端，單個或呈短鏈排列，寬×長為（0.6~0.7）×（3-4）微米。能運動，革蘭氏陽性，芽孢橢圓形，中生或次端生。該菌存在半透明型和不透明型兩種不同的菌落形態，對兩種菌落分別進行傳代，半透明菌落能產生半透明和不透明型菌落，且基本各占一半。而不透明菌落在傳代過程中只產生少許的半透明菌落，且傳至第4代時半透明型菌落消失。該菌能水解淀粉，降解甘露聚糖、木聚糖、纖維素等。?

微生物的培養篩選方法:?

通過在瓊脂培養基上打孔抑菌試驗，從分離菌株中篩選出對霍亂弧菌抑制作用較強的拮抗菌。?

相對于現有技術中的方案，本發明的優點是：?