[發明專利]一種甘蔗轉基因瞬時表達葉片受體材料的制備方法

有效

• 申請號: 201210392005.4
• 申請日: 2012-10-16
• 公開（公告）號: CN102911929A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 高三基;米爾科夫艾瑞克;陳如凱;林藝華;付為林;傅華英;陳永武
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12N15/87;C12N5/04
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種甘蔗轉基因瞬時表達葉片受體材料的制備方法，其特征在于操作步驟如下：

（1）甘蔗葉片外植體田間采樣：取生長正常且無病蟲害的甘蔗植株梢部，去除老葉和生長出來的上部葉片；

???（2）甘蔗葉片外植體表面消毒：去除梢部葉片和蔗莖，留20-30厘米長的葉片組織，用體積比75%酒精溶液消毒后，移入無菌的超凈工作臺；

???（3）甘蔗葉片外植體制備：剝去-1和-2葉及以外的葉片，取-3和-4嫩葉，去除中脈后將基部幼嫩葉片切成2厘米×2厘米的小方塊，平鋪于的MS0.6固體培養基上，上表面朝下；所述MS0.6固體培養基為：改良MS+0.5?g/L水解酪蛋白+0.6?mg/L?2,4-D+30?g/L蔗糖+6.0?g/L瓊脂粉；所述改良MS培養基的配方如表1所示；

?????????????????表1???改良MS培養基配方

（4）甘蔗葉片外植體預培養：小方塊幼嫩葉片在28?℃條件下暗培養3-5天后，即可作為甘蔗轉基因瞬時表達葉片受體材料。

2.由權利要求1的方法制備的甘蔗轉基因瞬時表達葉片受體材料，在甘蔗外源基因表達、啟動子分析、基因沉默研究中的應用。