[發(fā)明專(zhuān)利]一種水楊苷對(duì)照品的制備工藝

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210388464.5
• 申請(qǐng)日: 2012-10-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102863483A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 房春林;吳學(xué)淵;李超;楊海涵;李猶平
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都乾坤動(dòng)物藥業(yè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07H15/203
• 分類(lèi)號(hào): C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 曹志霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及對(duì)照品的制備領(lǐng)域，確切地說(shuō)是指一種水楊苷對(duì)照品的制備工藝。

背景技術(shù)

水楊苷為白色結(jié)晶；味苦；熔點(diǎn)199～202℃，比旋光度【α】厙-45.6°（0.6克/100厘米3無(wú)水乙醇）；可溶于水，易溶于沸水，難溶于乙醇(1:90)，不溶于醚或氯仿，但能溶于堿溶液、吡啶或冰醋酸中，其水溶液呈中性反應(yīng)，分子中無(wú)游離酚羥基，屬于酚苷類(lèi)化合物；經(jīng)稀酸或苦杏仁酶水解，可生成葡萄糖和水楊醇。水楊醇的分子式為C7H8O2；為斜方無(wú)色針晶；熔點(diǎn)86～87℃；熱至100℃升華；可溶于水、苯，易溶于乙醇、醚、氯仿；遇硫酸呈紅色。目前，現(xiàn)有技術(shù)的水楊苷對(duì)照品的制備工藝存在一定缺陷，需要改進(jìn)，以更好地符合中藥標(biāo)準(zhǔn)品的要求。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述缺陷，本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題在于提供一種水楊苷對(duì)照品的制備工藝，能夠很好地符合中藥標(biāo)準(zhǔn)品的要求。

為了解決以上的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供的水楊苷對(duì)照品的制備工藝，包括如下步驟：

（1）楊樹(shù)花中水楊苷提取：取楊樹(shù)花4kg，剪碎，加15倍量水煎煮提取兩次，每次1.2-1.8h，合并兩液，過(guò)濾，濾液靜置過(guò)夜，取上層澄清提取液A，備用；

（2）大孔樹(shù)脂初步分離水楊苷，包括以下步驟（21）和步驟（22）：

（21）大孔樹(shù)脂的預(yù)處理：取大孔樹(shù)脂D-1015kg，加丙酮8000-10000ml攪拌，浸泡10-14小時(shí)，裝入層析柱，排盡丙酮，蒸餾水沖洗至無(wú)丙酮味，加92%-98%乙醇沖洗后，加蒸餾水28-32L浸泡，用4%-6%鹽酸4-6L沖洗樹(shù)脂后，加蒸餾水沖洗至pH至6-7，用4%-6%NaOH4-6L沖洗樹(shù)脂，后用蒸餾水沖洗至pH至6-7，加92%-98%乙醇浸泡過(guò)夜，放出乙醇，用蒸餾水沖洗至無(wú)醇味，備用；

（22）吸附和解吸附：將步驟（1）中提取液A加入大孔吸附樹(shù)脂中上樣吸附24h以上，吸附速率為10-16L/h，用水洗至流出液變?yōu)闇\黃色后，用15%-25%乙醇洗樹(shù)脂至TLC檢測(cè)無(wú)水楊苷，收集15%-25%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得濃縮液B，保存?zhèn)溆茫?/p>

（3）正丁醇萃取：取濃縮液B，加正丁醇萃取3次，每次6-10L，合并萃取液，減壓回收正丁醇，回收完畢后樣品中加少量甲醇，繼續(xù)回收溶劑，得水楊苷樣品粗品C；

（4）正相硅膠法分離純化水楊苷：取200目-300目的硅膠1.2-1.8kg，加2-4L氯仿-甲醇=8：1溶液混合均勻，裝柱；取樣品粗品C，加甲醇溶解，加硅膠150-250g拌樣，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收溶劑后，上樣，依次采用氯仿-甲醇比例依次為7：1、4：1、3：1的溶液及純甲醇梯度洗脫，分段收集各流份；洗脫產(chǎn)品分別以TLC檢測(cè)，合并含水楊苷且雜質(zhì)干擾小的洗脫液，回收適量溶劑，待析出晶體后，用少量甲醇潤(rùn)洗，過(guò)濾，得水楊苷粗品D，備用；

（5）水楊苷的重結(jié)晶：取水楊苷粗品D，加適量甲醇熱溶，室溫冷卻結(jié)晶，待析出晶體后，過(guò)濾，收集結(jié)晶，如此重復(fù)操作至濾液無(wú)色，收集結(jié)晶，至真空干燥箱中干燥，得水楊苷標(biāo)準(zhǔn)品。

優(yōu)選地，在步驟（1）中，取上層澄清提取液A的體積為90L-100L。

優(yōu)選地，在步驟（2）中：

（21）大孔樹(shù)脂的預(yù)處理：取大孔樹(shù)脂D-1015kg，加丙酮8000-10000ml攪拌，浸泡12小時(shí)，裝入層析柱，排盡丙酮，蒸餾水沖洗至無(wú)丙酮味，加95%乙醇沖洗后，加蒸餾水30L浸泡，用5%鹽酸5L沖洗樹(shù)脂后，加蒸餾水沖洗至pH至6-7，用5%NaOH5L沖洗樹(shù)脂，后用蒸餾水沖洗至pH至6-7，加95%乙醇浸泡過(guò)夜，放出乙醇，用蒸餾水沖洗至無(wú)醇味，備用；

（22）吸附和解吸附：將步驟（1）中提取液A加入大孔吸附樹(shù)脂中上樣吸附24h以上，吸附速率：14L/h，用水洗至流出液變?yōu)闇\黃色后，用20%乙醇洗樹(shù)脂至TLC檢測(cè)無(wú)水楊苷，收集20%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇至無(wú)醇味，得濃縮液B，保存?zhèn)溆谩?/p>

優(yōu)選地，在步驟（3）中：取濃縮液B，加正丁醇萃取3次，每次8L，合并萃取液，減壓回收正丁醇，回收完畢后樣品中加少量甲醇，繼續(xù)回收溶劑，得水楊苷樣品粗品C。