[發明專利]一種建立甲狀腺功能減低Wistar大鼠眼眶模型的方法

有效

• 申請號: 201210388134.6
• 申請日: 2012-10-15
• 公開（公告）號: CN102872449A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 李方都;褚俏梅;劉兵;蔡德生;藥小萍
• 申請（專利權）人: 上海市普陀區利群醫院
• 主分類號: A61K38/24
• 分類號: A61K38/24;A61K51/00;A01K67/027
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 巫蓓麗

技術領域

本發明涉及一種動物模型的構建方法，具體地說，是一種建立甲狀腺功能減低Wistar大鼠眼眶模型的方法。

背景技術

臨床上進行¹³¹I治療GD甲亢過程中如發生甲減，極有可能存在TAO惡化的危險性，部分患者可能誘發Graves眼?。℅O）的發生，其發病機制尚不十分清楚，預防和治療都比較棘手，目前尚無比較合適的動物模型用以觀察這類眼眶組織的病理改變。?

長期以來一直尋找¹³¹I治療GD后甲減誘發GO的原因，并通過動物模型觀察眼眶組織學變化了解其發病機制，目前已有多種方法制作了甲亢或甲減及其相關眼病的動物模型。

一、首先實驗動物的選擇上，主要是大鼠，因大鼠的甲狀腺功能以及下丘腦-垂體-甲狀腺軸與人類基本相似，且其價格低廉、分布廣、繁殖快、體積小、易于飼養管理。

二、常用甲減模型：

1、低碘甲減模型：房輝等制作動物模型的方法為:?Wistar?鼠食用重度缺碘地區糧食配制的飼料加去離子水，3月后即可成模。

2、化學誘導甲減模型：已成功證實以下化學物質能誘發甲減：丙基硫氧嘧啶(?PTU)?/?碘番酸(?IOP)?、PTU、甲基硫氧嘧啶(MTU)?、他巴唑(MZ)?、甲狀腺激素(TH)?、¹³¹I、過氯酸鈉(NaClO₄)?。

Rebagliati?等取240～280g?Wistar?雄鼠，腹腔注射^131?I?1月，造模成功。^131?I?法是通過^131?I物理作用，其機理主要為發射β射線殺傷甲狀腺細胞，使甲狀腺素（TH）分泌減少。

3、先天性甲減模型：既可以用低碘飼料，也可以用化學誘導劑來誘發，不同的是所選動物為懷孕雌鼠。

4、轉基因甲減模型。

5、甲狀腺切除甲減模型：甲狀腺切除甲減模型是經典的甲減模型,?切除絕大部分甲狀腺必定造成甲減。

以上甲減模型用于甲亢經^131?I仍不理想，沒有良好地模擬疾病發展的自然狀態。同時由于甲減病因復雜，目前的甲減動物模型還沒有囊括所有病因的甲減，大多限于原發性甲減和TSH?抵抗綜合癥的研究，對于繼發性甲減和TSH?抵抗綜合癥則研究甚少。

三、方法對比總結。

低碘甲減模型(包括低碘先天性甲低模型)存在耗時、耗費等缺點。

化學誘導甲減模型(包括化學誘導甲減模型)存在耗時、耗資、不能較好模擬自然病程等缺點。

轉基因甲減模型存在操作過程復雜、技術性強、成功率低等缺點。

雖然切除甲減模型簡單易操作、造模成功率高可達100?%，但不是甲亢治療后的自然甲減。

以上的模型均與實際的甲亢經內照射致甲減的眼病比較，其誘因和發展過程有較大區別。另外，各模型間造模成功的標準也不同。應該根據研究目的不同，制造不同的甲減動物模型。同時具備耗時耗費少、操作簡單、成功率高、模擬疾病發展的自然狀態的條件是才是理想的甲減動物模型。目前直接采用內照射甲亢動物的方法致甲減的眼眶模型，國內外尚未查到文獻報道。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供一種建立甲狀腺功能減低Wistar大鼠眼眶模型的方法。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案是：一種建立甲狀腺功能減低Wistar大鼠眼眶模型的方法，所述的方法包括以下步驟：a、使用人類促甲狀腺激素腹腔注射Wistar大鼠形成甲亢；b、通過放射性¹³¹I內照射Wistar大鼠。

所述的步驟b中通過放射性¹³¹I內照射Wistar大鼠的方法是腹腔注射¹³¹I碘化鈉。

所述的¹³¹I碘化鈉的腹腔注射劑量為300μci或500μci/每只。

所述的腹腔注射¹³¹I碘化鈉的時間是第8周。

所述的方法包括以下步驟：a、人類促甲狀腺激素用0.9%生理鹽水稀釋到83.2μg/mL，大鼠腹腔注射，注射劑量為100μL/每只；b、第8周腹腔注射¹³¹I碘化鈉注射液，注射劑量為300μci或500μci/每只。

本發明優點在于：

1、該動物模型制作簡單，費用低，易重復；

2、成功率高，85%發生甲減，甲狀腺組織且有甲減的普遍特征；