[發(fā)明專利]解淀粉芽孢桿菌及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210382963.3
• 申請(qǐng)日: 2012-10-10
• 公開（公告）號(hào): CN103045498A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李衛(wèi)芬;鄧斌;張小平;黃琴;姚江濤;余東游
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23K1/16;C12R1/07
• 代理公司: 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種有抑菌效果和提高動(dòng)物免疫能力的解淀粉芽孢桿菌的篩選及應(yīng)用。

背景技術(shù)

我國作為世界水產(chǎn)大國，也是世界上唯一水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量高于捕撈產(chǎn)量的國家，2002年水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量高達(dá)2770萬噸，約占世界水產(chǎn)養(yǎng)殖總產(chǎn)量的70％，這主要得益于我國水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化程度的不斷提高。水產(chǎn)養(yǎng)殖已成為我國漁業(yè)發(fā)展的重點(diǎn)，是我國大農(nóng)業(yè)中發(fā)展較快、活力較強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)效益較高的產(chǎn)業(yè)之一。伴隨著我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，各類水產(chǎn)病害亦迅猛增長(zhǎng)，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，目前水產(chǎn)養(yǎng)殖病害在300種以上，每年約有1/10?的養(yǎng)殖面積發(fā)生病害，年損失產(chǎn)量占養(yǎng)殖總產(chǎn)量的15?%～30?%?，經(jīng)濟(jì)損失高達(dá)數(shù)百億元，水產(chǎn)動(dòng)物病害已成為影響我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要制約因素（黃艷平等，2004）。

針對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)病害爆發(fā)頻率的加劇，抗生素作為重要的抗細(xì)菌性疾病的藥物，在水產(chǎn)養(yǎng)殖上得到廣泛應(yīng)用。如用青霉素和硫酸鏈霉素治療親魚產(chǎn)后受傷引起感染及羅非魚的潰爛病、赤皮病、打印病；用慶大霉素治療草魚“三病”（腸炎病、爛鰓病、赤皮病）；用紅霉素治療球菌引起的感染和虹鱒魚的細(xì)菌性腎臟疾病等都收到良好的效果；加氯霉素可以抑制淡水養(yǎng)殖中的致病性氣單胞菌，氟喹諾酮類抗菌素可以抑制海水養(yǎng)殖中致病性弧菌。這在一定程度上極大地促進(jìn)了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。但同時(shí)，養(yǎng)殖水體中長(zhǎng)期使用抗生素已引發(fā)一系列環(huán)境和社會(huì)問題，尤其是過量的使用抗生素使水體微生物選擇壓力增大，一方面導(dǎo)致抗藥微生物滋生，可改變水體微生物群落結(jié)構(gòu)，惡化水體的適養(yǎng)性，另一方面引起水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)菌群失調(diào)，易引發(fā)內(nèi)源性、外源性和二重感染(胡彩紅,?2005)。因此，限制和減少抗生素類藥物在水產(chǎn)養(yǎng)殖水體中的使用，尋找抗生素的替代品已經(jīng)成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的必然趨勢(shì)。

益生菌不僅可避免抗生素的副作用、達(dá)到防治疾病的效果，而且能促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。近年來，益生菌作用抗生素類藥物的替代物，在養(yǎng)殖業(yè)得到廣泛的關(guān)注。現(xiàn)代微生態(tài)學(xué)研究表明，微生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中占有重要的地位，直接影響產(chǎn)量、物質(zhì)循環(huán)、動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)、水質(zhì)、疾病控制及養(yǎng)殖水環(huán)境(Moriarty,?1998)。隨著微生物學(xué)和微生態(tài)學(xué)的深入研究，利用益生菌來調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)生態(tài)環(huán)境、改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境、增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抑制病原微生物、減少疾病發(fā)生，正逐漸成為各國研究熱點(diǎn)。由于益生菌制品沒有殘留，也不會(huì)產(chǎn)生抗藥性，在中國、印度等水產(chǎn)養(yǎng)殖大國得到廣泛的應(yīng)用，并主張用其替代抗生素。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種解淀粉芽孢桿菌，該解淀粉芽孢桿菌有抑菌效果和提高動(dòng)物免疫能力。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種解淀粉芽孢桿菌，保藏名稱：解淀粉芽孢桿菌?SC06?(Bacillus?amyloliquefaciens?SC06)，保藏單位：中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：中國?武漢?武漢大學(xué)；保藏日期：2012年7月11日，保藏號(hào)：CCTCC?No:?M2012280。

本發(fā)明還同時(shí)提供了上述解淀粉芽孢桿菌的用途，用于抑菌或者用于提高動(dòng)物的免疫能力。

作為本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌的用途的改進(jìn)：動(dòng)物為水生動(dòng)物或畜禽。

本發(fā)明以SC06菌株總DNA為模板，使用通用引物：

上游引物（P1）：5’－AGAGTTTGATCCTGGTCAGAACGAACGCT?－3’

下游引物（P6）：5’－TACGGCTACCTTGTTACGACTTCACCCC?－3’；

進(jìn)行?PCR擴(kuò)增獲得的16s?rDNA部分序列；通過Blast與GenBank收錄的細(xì)菌16s?rDNA基因序列比對(duì)，發(fā)現(xiàn)SC06菌株與解淀粉芽孢桿菌的同源性為99%。

本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌可作為益生菌用于提高水生動(dòng)物、畜禽生長(zhǎng)，并提高其抗氧化和免疫功能。

本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌實(shí)際使用時(shí)，可采取向水中投放解淀粉芽孢桿菌?SC06的方法，一般控制解淀粉芽孢桿菌?SC06在水體中的濃度為0.5~5×10⁷CFU/mL；也可在每克常規(guī)水生動(dòng)物/畜禽基礎(chǔ)日糧中添加解淀粉芽孢桿菌?SC06??0.5~5×10⁵CFU。本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌也可先制成干菌粉，再進(jìn)行如上操作。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)說明。

圖1是SC06的掃描電鏡圖片；

圖2是SC06對(duì)甲魚生長(zhǎng)的影響對(duì)比圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1、解淀粉芽孢桿菌SC06的獲得