[發(fā)明專利]一種大口黑鱸精子超低溫冷凍保存及復(fù)蘇方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210382548.8 | 申請(qǐng)日： | 2012-10-11 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN103719071A | 公開（公告）日： | 2014-04-16 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 徐海華;王榮泉;宣云峰 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 吳江市長(zhǎng)漾漁業(yè)生態(tài)科技發(fā)展有限公司 |
| 主分類號(hào)： | A01N1/02 | 分類號(hào)： | A01N1/02;C12N5/076 |
| 代理公司： | 蘇州華博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32232 | 代理人： | 魏亮芳 |
| 地址： | 215221 江*** | 國(guó)省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 大口 精子 超低溫 冷凍 保存 復(fù)蘇 方法 | ||
1.一種大口黑鱸精子超低溫冷凍保存及復(fù)蘇方法，其特征在于，所述方法包括：（1）精液采集，（2）抗凍液選擇，（3）精子的稀釋與平衡，（4）精子的冷凍，（5）精子的解凍與復(fù)蘇；
精液采集：選擇形態(tài)正常、生長(zhǎng)良好、無疾病、達(dá)到性成熟的大口黑鱸個(gè)體，在大口黑鱸繁殖期按800UI/kg胸鰭注射進(jìn)行誘導(dǎo)促熟，36h后收集精液于4℃冰箱中預(yù)冷的干凈研缽中；
抗凍液選擇：以任氏液為基礎(chǔ)，加10%甲醇抗凍保護(hù)劑；
精子的稀釋與平衡：精液與任氏液按1:6稀釋后，經(jīng)4℃平衡30min，加入10%甲醇，混勻，分裝；?
精子的冷凍：分裝好的精液在液氮面上方6cm處平衡10min，在液氮面上平衡5min后投入液氮中保存；
精子的解凍與復(fù)蘇：將凍存管在液氮蒸汽中平衡5分鐘，迅速置于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)至融化。
2.一種大口黑鱸精子超低溫冷凍保存及復(fù)蘇方法的用途，其特征在于，以所述大口黑鱸精子超低溫冷凍保存及復(fù)蘇方法保存的精子用于進(jìn)行人工授精：將大口黑鱸魚卵擠入容器中，按105:1的精卵數(shù)量比例滴加入解凍后的精液，拌勻，再滴加適量激活液，拌勻，使卵受精。
3.如權(quán)利要求2所述的大口黑鱸精子超低溫冷凍保存及復(fù)蘇方法的用途，其特征在于，所述激活液由10?mM?Trfs、20?mM?NaC1和2?mM?CaCl2配成，配好后的激活液pH=8.5。
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