[發明專利]一種膠乳免疫比濁法進行幽門螺桿菌抗體檢測的試劑盒

有效

• 申請號: 201210382122.2
• 申請日: 2012-10-10
• 公開（公告）號: CN102854314A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 張英偉
• 申請（專利權）人: 深圳康美生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/531;G01N33/536;G01N21/31
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊

1.一種采用膠乳免疫比濁法檢測幽門螺桿菌抗體含量的試劑盒，其特征在于，包含試劑R1、試劑R2、幽門螺桿菌抗體校準品；所述試劑R1為pH值6.5-8.5的緩沖液，所述試劑R2為幽門螺桿菌基因重組抗原膠乳試劑。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述R2試劑中幽門螺桿菌基因重組抗原膠乳試劑與幽門螺桿菌的尿素酶B亞單位UreB、幽門螺桿菌黏附素HpaA、空泡毒素VacA、細胞毒素相關蛋白CagA、熱休克蛋白HspB、鞭毛蛋白A亞單位FlaA和B亞單位FlaB中的一種特異性結合。

3.根據權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于：所述緩沖液選自Tris/HCl緩沖液、磷酸鹽緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖液、巴比妥緩沖液、MOPSO緩沖液、DIPSO緩沖液、HEPPS緩沖液中的一種，并含有0.7%-0.9%的NaCl、1%-6%的PEG?6000、0.01%-0.1%的Tween80。

4.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述R2試劑中所述基因重組抗原的氨基酸序列如SEQ?ID?No.2所示。

5.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于：所述的幽門螺桿菌基因重組抗原膠乳試劑的制備包括如下步驟：

步驟1：聚苯乙烯膠乳溶液的準備：以pH為5的MES溶液分散膠乳，用EDC活化12-15分鐘形成粒徑為90nm-300nm，具有羧基官能團的膠乳；

步驟2：14000轉/分鐘，離心10分鐘收集膠乳沉淀，分散膠乳，調整膠乳濃度；

步驟3：加入基因重組抗原，室溫攪拌后加入封閉液，混合均勻，室溫攪拌以10，000rpm的速度離心10-20分鐘，去除上清液；

步驟4：以緩沖液洗滌分散步驟3所得沉淀，加入含0.1％BSA的PBS緩沖液洗滌分散即得。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：步驟2所述分散為以PB?S震蕩分散或超聲分散。

7.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：步驟3所述基因重組抗原的氨基酸序列如SEQ?ID?No.2所示。

8.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：步驟3中所述封閉液為用0.1％BSA的PBS緩沖液。

9.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：還包含穩定劑和防腐劑。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于：所述穩定劑選自蛋白質、氨基酸、無機鹽、表面活性劑、助懸劑或抗氧劑中的一種或多種；所述的防腐劑選自0.1％的疊氮鈉、Proclin-300或慶大霉素。