[發(fā)明專利]一種DPPH-HPLC法檢測白刺果汁中抗氧化成分的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210381835.7
• 申請日: 2012-10-11
• 公開（公告）號: CN102879499A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳晨;李玉林;陶燕鐸;邵赟;梅麗娟;趙曉輝;岳會蘭;陳濤
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院西北高原生物研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 李艷華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種果汁抗氧化成分的檢測方法，尤其涉及一種DPPH-HPLC法檢測白刺果汁中抗氧化成分的方法。

背景技術(shù)

白刺果汁是以白刺屬植物白刺（Nitraria?sibirica）的成熟果實去除籽皮后得到的果汁，因其中含有抗氧化物質(zhì)，因而具有較強的抗氧化性，呈紫紅色，無毒，應(yīng)用于醫(yī)藥、食品及化妝品。但是，目前白刺果汁抗氧化成分還沒有完整的檢測方法，不利于保證白刺果汁的品質(zhì)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種簡單、快速、準(zhǔn)確的DPPH-HPLC法檢測白刺果汁中抗氧化成分的方法。

為解決上述問題，本發(fā)明所述的一種DPPH-HPLC法檢測白刺果汁中抗氧化成分的方法，其特征在于：該方法首先將質(zhì)量濃度為0.01~5%的抗氧化劑1,1-二苯基-2三硝基苯肼（DPPH）與白刺果汁按100:1~250:1的體積比在溫度為25~35℃的條件下避光反應(yīng)15min~30min，得到反應(yīng)后白刺果汁；然后分別將未反應(yīng)白刺果汁與所述反應(yīng)后白刺果汁注入高效液相色譜（HPLC）中檢測，分別得到未反應(yīng)白刺果汁的色譜圖與反應(yīng)后白刺果汁的色譜圖；最后，比較所述未反應(yīng)白刺果汁的色譜圖與所述反應(yīng)后白刺果汁的色譜圖中相應(yīng)的各個峰的峰面積；若峰面積減少的峰，即說明白刺果汁中具有抗氧化成分。

所述白刺果汁是指白刺原果汁或5000道爾頓有機膜過濾后的白刺果汁。

所述高效液相色譜（HPLC）檢測方法是指流動相A為甲醇，流動相B為純凈水；流速為0.8~1.5?mL/min，檢測波長為210?nm~390?nm；流動相條件為：0?min?~20?min，5%A~5%A，95%B~95%B；20?min?~25?min，5%A~15%A，95B%~85%B；25?min~50?min，15%A?~25%A，85%B~75%B。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點：

1、由于本發(fā)明采用DPPH-HPLC法測定白刺果汁中抗氧化成分，而該法具有所用試劑量少、操作簡單方便、靈敏度高、精密度高穩(wěn)定性好等特點，因此，適宜測定白刺果汁抗氧化成分，從而實現(xiàn)對白刺果汁進(jìn)行保健功能的有效性評價。

2、由于本發(fā)明采用DPPH-HPLC法測定白刺果汁中抗氧化成分，而該法只需比較對應(yīng)峰的峰面積即可判斷抗氧化成分。如圖1為白刺果汁的色譜圖，即未加入DPPH溶液的白刺果汁色譜圖。圖2?為加入DPPH后的白刺果汁的色譜圖。比較色譜圖中各個色譜峰，其中色譜圖中色譜峰A、B、C、D、E的峰面積減少，說明化合物A、B、C、D、E為抗氧化成分。

3、本發(fā)明簡單、快速，易于推廣。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

圖1為未加入抗氧化劑DPPH色譜圖。

圖2為加入抗氧化劑DPPH色譜圖。

具體實施方式

實施例1???一種DPPH-HPLC法檢測白刺果汁中抗氧化成分的方法，該方法首先將質(zhì)量濃度為0.01%的抗氧化劑1,1-二苯基-2三硝基苯肼（DPPH）與5000道爾頓有機膜過濾后的白刺果汁按100:1的體積比（mL/mL）在溫度為35℃的條件下避光反應(yīng)15min，得到反應(yīng)后白刺果汁；然后分別將未反應(yīng)白刺果汁與反應(yīng)后白刺果汁注入高效液相色譜（HPLC）中檢測，分別得到未反應(yīng)白刺果汁的色譜圖與反應(yīng)后白刺果汁的色譜圖；最后，比較未反應(yīng)白刺果汁的色譜圖與反應(yīng)后白刺果汁的色譜圖中相應(yīng)的各個峰的峰面積；若峰面積減少的峰，即說明白刺果汁中具有抗氧化成分。

其中：高效液相色譜（HPLC）檢測方法是指流動相A為甲醇，流動相B為純凈水；流速為1.0?mL/min，檢測波長為210?nm；流動相條件為：0?min?~20?min，5%A~5%A，95%B~95%B；20?min?~25?min，5%A~15%A，95B%~85%B；25?min~50?min，15%A?~25%A，85%B~75%B。