[發(fā)明專利]一種治療急慢性胃腸炎的益智仁組合物及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210380782.7
• 申請(qǐng)日: 2012-10-10
• 公開（公告）號(hào): CN103721148A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張俊清;李永輝;王生;魏娜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 海南醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K36/9062
• 分類號(hào): A61K36/9062;A61P1/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及從益智仁中提取分離一種治療急慢性胃腸炎的組合物及其在制備藥物方面的應(yīng)用，屬藥學(xué)領(lǐng)域。?

背景技術(shù)：

益智仁為姜科植物益智Alpinia?oxyphylla?Miq.的干燥成熟果實(shí)，主產(chǎn)于我國(guó)的海南和廣東地區(qū)，為四大南藥之一。中藥益智藥理活性廣泛，目前研究資料表明益智可以拮抗鈣離子活性、抗腫瘤作用、抗衰老作用、抗過敏作用、抑制細(xì)胞中NO的產(chǎn)生和脫粒作用以及對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用。益智在傳統(tǒng)應(yīng)用中主要以溫脾止瀉和固精縮尿?yàn)橹黧w?，F(xiàn)代中醫(yī)臨床對(duì)于中焦虛寒或脾腎虛寒的泄瀉，也多重用益智。然而從益智仁中制備成分清楚、質(zhì)量穩(wěn)定的組合物，用于急慢性胃腸炎的預(yù)防和治療，目前尚未見報(bào)道。?

本發(fā)明的目的就是要提供一種益智仁組合物，其含有倍半萜、黃酮和二苯基庚烷類物質(zhì)，具有顯著的治療胃腸炎腹瀉的作用，可用于藥物制備方面的應(yīng)用。?

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明所述的益智仁組合物，經(jīng)過試驗(yàn)篩選出最佳提取純化方法，經(jīng)HPLC色譜顯示其主要含有8個(gè)化合物，其中圓柚酮、楊芽黃素和益智酮甲含量較高。在獲得該提取物后，經(jīng)海南醫(yī)學(xué)院海南省熱帶藥用植物研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室對(duì)其進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)與治療胃腸炎的藥效學(xué)試驗(yàn)。?

1益智仁組合物的制備?

益智仁組合物用以下方法制備而成：取一定質(zhì)量的益智仁，加入一定量的乙醇回流提取，收集提取液，上大孔樹脂，先以低濃度乙醇洗脫除去雜質(zhì)，再以高濃度乙醇洗脫，并濃縮成浸膏狀，得到益智仁組合物。?

本發(fā)明益智仁組合物的制備方法最好是：取一定質(zhì)量的益智仁，加入1～20倍量的乙醇回流提取1～3次，收集合并提取液，上大孔樹脂，低濃度乙醇洗脫除去雜質(zhì)，再以高濃度乙醇洗脫，并濃縮成浸膏狀，得到益智仁組合物。?

制備益智仁組合物方法中提取用乙醇濃度優(yōu)選70％～95％，最好是用95％的乙醇；乙醇用量?jī)?yōu)選5～20倍量，最好為10倍量；除去雜質(zhì)的乙醇優(yōu)選用30％～70％，最好用60％的乙醇；活性組分洗脫乙醇優(yōu)選用80～100％，最好用90％的乙醇。按照最佳提取和純化條件，制備益智仁組合物，分別得益智仁95％提取物(樣品1)、益智仁60％大孔樹脂除雜洗脫物(樣?品2)和益智仁90％乙醇洗脫組合物(樣品3)。分別將樣品1～3進(jìn)行HPLC分析，其色譜圖見圖1～3。?

2益智仁組合物樣品的HPLC分析?

2.1樣品制備?

取益智仁樣品1～3適量，精密稱定，加乙腈制成含量為1mg/ml作用的樣品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定。?

2.2色譜條件?

Agilent1200液相色譜儀；色譜柱：Phenonemex?Gemini?C6-Phenyl(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：水(A)-乙腈(B)，梯度洗脫[0～15min，A-B(70：30)→A-B(56：44)；15～40min，A-B(56：44)；40～50min，A-B(56：44)→A-B(30：70)]；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：5μL。?

經(jīng)與對(duì)照品對(duì)照，保留時(shí)間為42.5分鐘的化合物鑒定為圓柚酮，保留時(shí)間為44.5分鐘的化合物鑒定為楊芽黃素，保留時(shí)間為51.5分鐘的化合物鑒定為益智酮甲。?

結(jié)果顯示最佳條件制備的益智仁組合物主要含有8個(gè)化合物，其中圓柚酮、楊芽黃素和益智酮甲含量較高。?

3急性毒性試驗(yàn)?

3.1.試驗(yàn)材料：?

SPF級(jí)昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22g；小鼠灌胃器；吐溫-80?

3.2.試驗(yàn)方法與結(jié)果：?

取最佳條件制備的益智仁組合物，以吐溫-80為助溶劑，加水配成最大濃度混懸液(0.86g·ml^-1)。?

預(yù)試驗(yàn)：取昆明種小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組4只，禁食不禁水12h后，在天內(nèi)分別按17.20g·kg^-1、25.40g·kg^-1、34.40g·kg^-1灌胃給予益智仁組合物(每次灌胃體積0.2ml/10g，1天內(nèi)最多給藥2次)，給藥后觀察小鼠生存狀態(tài)，連續(xù)觀察7天。結(jié)果見表1。?

預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無法找出其100％致死劑量，正式試驗(yàn)欲找出其最大耐受量。?