[發明專利]采用免疫熒光試劑盒測定人腦型脂肪酸結合蛋白的方法

無效

• 申請號: 201210379054.4
• 申請日: 2012-10-09
• 公開（公告）號: CN103713135A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 楊顯
• 申請（專利權）人: 楊顯
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

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技術領域：

本發明涉及醫學技術領域，具體涉及采用免疫熒光試劑盒測定人腦型脂肪酸結合蛋白的方法。

背景技術：

自標記免疫測定技術出現以來，在醫學和生物學研究中被廣泛應用，但是現有免疫試劑盒還不可以同時測定重組或天然的人腦型脂肪酸結合蛋白,且現有的免疫試劑盒在測定過程中抗干擾分析特異性差，使測定結果不穩定、偏差大。

發明內容：

本發明的目的是提供采用免疫熒光試劑盒測定人腦型脂肪酸結合蛋白的方法，它可以同時測定重組或天然的人腦型脂肪酸結合蛋白,且在使用免疫熒光試劑盒測定過程中使用特殊的熒光物質為發光材料，使測定結果更穩定、偏差小。

為了解決背景技術所存在的問題，本發明采用以下技術方案：它的測定方法分為各種標本的采集方法和采用免疫熒光試劑盒測定各個標本中人腦型脂肪酸結合蛋白方法。

本發明中主要采集是的細胞培養物上清液、人全血、血清、血漿和組織均漿標本，各種標本的采集方法為：1、細胞培養物上清液的采集：細胞培養物進行離心后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融；2、全血收集：采用抗凝管采血，在采血管里先加入EDTA抗凝劑，將采集血樣加入并搖勻備用，指尖，耳垂末梢或靜脈樣本采集后應盡可能立即使用；3、血清的采集方法為：將血清標本置于室溫4℃的情況下2小時，過夜后采用離心機進行離心20分鐘，取上清液即可檢測；4、血漿的采集：用EDTA或肝素作為抗凝劑，使血漿標本采集后30分鐘內使用，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融；5、組織均漿的采集：將動物的組織均漿標本先用PBS洗滌，除去多余血液，均漿后放在20mlPBS中于-20℃放置過夜，第二天，經過二次反復凍融破膜，將均漿采用離心機進行離心5分鐘，取上清液即可檢測。

采用免疫熒光試劑盒測定各個標本中人腦型脂肪酸結合蛋白的方法為：先將上述的各標本在使用前置室溫，然后對各個標本稀釋，稀釋方法為：取10～20ul標本樣品，加入1ml的樣品稀釋液，輕輕搖勻后待用，取稀釋后樣品60～90ul，加到免疫熒光層析板上的加樣孔里，反應3～15分鐘，將已經反應好的免疫熒光層析板放入免疫熒光分析儀掃描窗口，通過600～660nm波長下激發，650～680nm波長接收熒光信號，測量免疫熒光層析板里硝酸纖維素膜上的熒光信號。

本發明具有以下有益效果：它可以同時測定重組或天然的人腦型脂肪酸結合蛋白,且在使用免疫熒光試劑盒測定過程中使用特殊的熒光物質為發光材料，使測定結果更穩定、偏差小。

具體實施方式：

本具體實施方式采取以下技術方案：它的測定方法分為各種標本的采集方法和采用免疫熒光試劑盒測定各個標本中人腦型脂肪酸結合蛋白方法。

本發明中主要采集是的細胞培養物上清液、人全血、血清、血漿和組織均漿標本，各種標本的采集方法為：1、細胞培養物上清液的采集：細胞培養物進行離心后收集上清，并將標本保存于-20℃，且應避免反復凍融；2、全血收集：采用抗凝管采血，在采血管里先加入EDTA抗凝劑，將采集血樣加入并搖勻備用，指尖，耳垂末梢或靜脈樣本采集后應盡可能立即使用；3、血清的采集方法為：將血清標本置于室溫4℃的情況下2小時，過夜后采用離心機進行離心20分鐘，取上清液即可檢測；4、血漿的采集：用EDTA或肝素作為抗凝劑，使血漿標本采集后30分鐘內使用，或將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融；5、組織均漿的采集：將動物的組織均漿標本先用PBS洗滌，除去多余血液，均漿后放在20mlPBS中于-20℃放置過夜，第二天，經過二次反復凍融破膜，將均漿采用離心機進行離心5分鐘，取上清液即可檢測。

采用免疫熒光試劑盒測定各個標本中人腦型脂肪酸結合蛋白的方法為：先將上述的各標本在使用前置室溫，然后對各個標本稀釋，稀釋方法為：取10～20ul標本樣品，加入1ml的樣品稀釋液，輕輕搖勻后待用，取稀釋后樣品60～90ul，加到免疫熒光層析板上的加樣孔里，反應3～15分鐘，將已經反應好的免疫熒光層析板放入熒光免疫分析儀掃描窗口，通過600～660nm波長下激發，650～680nm波長接收熒光信號，測量免疫熒光層析板里硝酸纖維素膜上的熒光信號。

本具體實施方式具有以下有益效果：它可以同時測定重組或天然的人腦型脂肪酸結合蛋白,且在使用免疫熒光試劑盒測定過程中使用特殊的熒光物質為發光材料，使測定結果更穩定、偏差小。