[發(fā)明專利]牦牛乳酪蛋白抑菌肽的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210375206.3
• 申請日: 2012-10-05
• 公開（公告）號: CN102876764A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發(fā)明（設計）人: 謝小冬;宋禮;紀銀莉;高維東;何瀟;葛靜微;蘇艷萍
• 申請（專利權）人: 甘肅華羚生物技術研究中心
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/16
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張真

1.一種牦牛乳酪蛋白抑菌肽的制備方法，其特征是包括以下步驟：

（1）牦牛乳酪蛋白溶解：配置2%-10%的牦牛乳酪蛋白水溶液，調(diào)節(jié)溫度30℃-65℃，pH6.5-9.0，攪拌，使牦牛乳酪蛋白溶解；

（2）加胰蛋白酶水解：稱取按步驟（1）2%-10%的牦牛乳酪蛋的量加入0.5%-2%的胰蛋白酶，維持反應溫度30℃-65℃，pH6.5-9.0，反應1~4小時；

（3）滅活胰蛋白酶，升溫至80℃-100℃，維持15-30分鐘：

（4）沉淀酪蛋白：用鹽酸調(diào)節(jié)pH到3.8-4.6，使酪蛋白在其等電點處析出：

（5）離心：4000g-12000g離心力，離心除去酪蛋白沉淀，留上清液：

（6）葡聚糖凝膠層析分離：采用SephadexG25凝膠柱對離心液進行分部收集，檢測各收集液抑菌活性；

（7）質(zhì)譜測定分子量：采用質(zhì)譜儀對抑菌組分層析液進行分子量測定，確定肽分子量，確定超濾膜分子量范圍；

（8）超濾：取離心后上清液，過截留量1000Da-2500Da的超濾膜，收集分子量在1000Da-2500Da之間的多肽；

（9）噴霧干燥：取超濾液，采用噴霧干燥機，進行噴干，得到牦牛乳酪蛋白抑菌肽。

2.如權利要求1所述的牦牛乳酪蛋白抑菌肽的制備方法，其特征在于所述的牦牛乳酪蛋白為食品級；所述的鹽酸為食品級。

3.如權利要求1所述的牦牛乳酪蛋白抑菌肽的制備方法，其特征在于所選用的酶制劑為胰蛋白酶。