[發明專利]檢測腎上腺素受體激動劑的膠體金檢測卡及樣品處理方法

無效

• 申請號: 201210373270.8
• 申請日: 2012-09-27
• 公開（公告）號: CN102901821A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 杜道林;洪霞;薛永來;張禎
• 申請（專利權）人: 江蘇維賽科技生物發展有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N1/28
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

技術領域

本發明涉及一種檢測8種腎上腺素受體激動劑的膠體金檢測卡及樣品處理方法，屬于瘦肉精檢測技術領域。

背景技術

β-腎上腺素受體激動劑能夠加強心臟收縮、擴張骨骼肌血管和支氣管平滑肌，獸醫學和醫學上用于治療休克和支氣管痙攣。實驗證實，腎上腺素受體激動劑類藥物在動物體內對營養物質具有重新分配的作用，促進動物肌肉生長，促進動物體蛋白質沉淀，特別是骨骼肌中蛋白質的合成，抑制動物脂肪合成和積累，從而改善胴體品質，使生長速度加快，瘦肉相對增加10%以上。因其效果好，經濟回報高，因而國內外不少養殖場都非法使用本類藥物作飼料添加劑，造成畜禽肌肉組織中的殘留，通過食物鏈對人體產生毒性作用，極大的影響動物源性食品的安全性。

人食用了β-腎上腺素受體激動劑殘留的動物源性食品，可引起頭暈、心跳加快、肌肉震顫、心悸、呼吸困難等癥狀，嚴重的可引起中毒，對人體危害極大。近年來隨著不斷發生的因食用殘留β-腎上腺素受體激動劑的肉制品而造成的大規模中毒事件，歐盟、美國、中國等國家和地區都先后立法禁止在畜禽生產中使用促進動物生長的β-腎上腺素受體激動劑作為飼料添加劑。2002年我國農業部、衛生部發出的公告《禁止在飼料和動物飲水中使用的藥品種目錄》（農業部公告第176號）明確禁止鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西馬特羅、鹽酸多巴胺7種腎上腺素受體激動劑在食品動物中的使用，2012年12月苯乙醇胺A被農業部第1519號公告列為“禁止在飼料和動物飲水中使用的物質”。

腎上腺素受體激動劑種類繁多，目前對于動物源性食品中腎上腺素受體激動劑的免疫膠體金檢測卡，檢測的主要還是單項物質或者幾項物質，監管部門并不知道養殖戶使用了何種腎上腺素受體激動劑，檢測存在一定的盲目性，常常造成漏檢。因此本發明的這種同時檢測8種禁止在飼料和動物飲水中使用的腎上腺素受體激動劑的膠體金檢測聯卡具有非常迫切的市場需要與廣泛的市場前景。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能同時檢測8種腎上腺素受體激動劑的膠體金檢測卡，克服現有技術只能逐一單項或者幾項檢測的缺陷。

本發明的8種腎上腺素受體激動劑的膠體金檢測卡，包括包被了單克隆抗體膠體金標記物的膠體金結合墊、包被了鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西馬特羅、鹽酸多巴胺和苯乙醇胺A蛋白質偶聯物和兔抗鼠IgG的硝酸纖維素膜、樣品墊、吸水棉、PVC膠板及塑料模具等組成，在PVC膠板的一端依次粘附樣品墊、結合墊，中間黏貼硝酸纖維素膜，另一端粘附吸水棉。

8種禁止在飼料和動物飲水中使用的腎上腺素受體激動劑鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西馬特羅、硫酸沙丁胺醇和苯乙醇胺A的膠體金檢測卡檢測樣品的處理方法，檢測樣品為尿液樣品、飼料樣品或動物組織、肝臟等樣品，對于各種不同的檢測樣品有不同的處理方法。

針對尿液樣品的處理方法是：取待檢尿樣，若樣品比較混濁時，可3000?r/min以上，離心5?min或過濾，取上清進行檢測。

針對飼料樣品的處理方法是：準確稱取2±0.05?g均質后的飼料樣品于50?mL離心管中；加入10?mL?0.05?M?HCl，充分渦動1?min；加入10?mL?0.05?M?NaOH溶液調pH值至7-8充分渦動30?s，靜置5?min，取3-4滴上清液進行檢測。

針對動物組織、肝臟樣品的處理方法是：準確稱取2±0.01?g均質后的新鮮組織樣品于50?mL離心管中；加入1?mL?50?mM，pH7.0?Tris-HCl樣品抽提液，渦動至組織完全分散；經100℃水浴10分鐘，冷卻至室溫，棄掉乳化層，取清亮的中間部分作為測試樣品。

本發明的8種禁止在飼料和動物飲水中使用的腎上腺素受體激動劑的膠體金檢測聯卡能同時檢測出尿液樣品、飼料樣品或動物組織、肝臟等樣品中含有的鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、硫酸特布他林、硫酸沙丁胺醇、西馬特羅、鹽酸多巴胺和苯乙醇胺A，本雙排四聯檢測卡易于制備且節省檢測費用，使用方便快速，結果準確，大大提高腎上腺素受體激動劑的檢測率。

附圖說明