[發明專利]檢測大觀霉素、鏈霉素、慶大霉素和新霉素的試紙條及方法

有效

• 申請號: 201210372008.1
• 申請日: 2012-09-29
• 公開（公告）號: CN103713131A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 何方洋;馮才偉;張禹;付軍權;吳鵬;楊秀賢;李勇;邵曉雪
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測大觀霉素、鏈霉素、慶大霉素和新霉素的試紙條，其特征在于包括試紙條、微孔條、微孔試劑和微孔塞，所述試紙包括反應膜、樣品吸收墊、吸水墊、保護膜、底板，所述反應膜上有四條檢測線和一條質控線，四條檢測線分別包被有大觀霉素-載體蛋白偶聯物、鏈霉素-載體蛋白偶聯物、慶大霉素-載體蛋白偶聯物和新霉素-載體蛋白偶聯物，質控線包被有抗抗體，所述微孔試劑為凍干的大觀霉素特異性抗體-膠體金標記物、鏈霉素特異性抗體-膠體金標記物、慶大霉素特異性抗體-膠體金標記物和新霉素特異性抗體-膠體金標記物。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述試紙由樣品吸收墊、反應膜、吸水墊、保護膜依次黏貼在底板上組成，權利要求1所述微孔條上具有微孔塞。

3.根據權利要求2所述的試紙條，其特征在于：所述保護膜粘貼在試紙的樣品吸收墊上，為檢測端，上面有MAX標記線。

4.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于所述的大觀霉素檢測線靠近樣品吸收墊一端，質控線靠近吸水墊一端，鏈霉素、慶大霉素、新霉素檢測線在大觀霉素檢測線和質控線之間。

5.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：大觀霉素-載體蛋白偶聯物是通過取大觀霉素0.66?g、羧甲基羥胺0.27?g和吡啶1?ml于20?ml?DMSO中的混合液，在室溫下攪拌反應20小時，蒸除溶劑，柱層析純化后在乙醇-水體系中重結晶得到大觀霉素與羧甲基羥胺的縮合物，再與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白可為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白、人血清白蛋白。

6.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：鏈霉素-載體蛋白偶聯物是通過取1.0?g鏈霉素、0.30?g鄰苯二甲酸酐和1?ml吡啶在20?ml?DMSO中的混合液，在80℃下攪拌反應24小時，蒸除溶劑，乙醇-水體系中多次重結晶得到鄰苯二甲酸單鏈霉素酯，再與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白可為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白、人血清白蛋白。

7.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：慶大霉素-載體蛋白偶聯物是通過取0.39?g溴乙酸叔丁酯在5?ml?DMSO中的溶液，40℃下緩慢滴加入0.90?g慶大霉素和1?ml?吡啶在10?ml?DMSO中的混合物中。滴加完畢后，繼續反應6小時后，蒸除溶劑。簡單柱層析分離后，除去溶劑，加入20?ml?DMSO和5?ml?甲酸，室溫反應20小時，蒸除溶劑，乙醇-水體系中重結晶得到羧甲基慶大霉素，再與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白可為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白、人血清白蛋白。

8.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：新霉素-載體蛋白偶聯物是通過取0.61?g?新霉素和10ml?DMSO的混合液，室溫下緩慢滴加入到0.14?g對苯二甲醛的10?ml?DMSO溶液中，滴加完畢后室溫至60℃反應2-4小時，除去溶劑，乙醇-水體系中重結晶得到新霉素對苯二甲醛單縮合物，再與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白可為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、甲狀腺蛋白、人血清白蛋白。

9.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：大觀霉素特異性抗體-膠體金標記物中的大觀霉素特異性抗體是以大觀霉素-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述大觀霉素特異性抗體為大觀霉素單克隆抗體；鏈霉素特異性抗體-膠體金標記物中的鏈霉素特異性抗體是以鏈霉素-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述鏈霉素特異性抗體為鏈霉素單克隆抗體；慶大霉素特異性抗體-膠體金標記物中的慶大霉素特異性抗體是以慶大霉素-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述慶大霉素特異性抗體為慶大霉素單克隆抗體；新霉素特異性抗體-膠體金標記物中的新霉素特異性抗體是以新霉素-載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得，所述新霉素特異性抗體為新霉素單克隆抗體。

10.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：所述微孔條底部含有凍干的大觀霉素特異性抗體-膠體金標記物、鏈霉素特異性抗體-膠體金標記物、慶大霉素特異性抗體-膠體金標記物和新霉素特異性抗體-膠體金標記物的微孔試劑。

11.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：所述微孔塞能夠緊密地塞在微孔條中。