[發明專利]一種吉利柘樹素B的制備方法

無效

• 申請號: 201210371890.8
• 申請日: 2012-09-29
• 公開（公告）號: CN102827130A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 劉東鋒;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D311/32
• 分類號: C07D311/32;C07D311/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及天然產物分離領域，特別是涉及一種吉利柘樹素B的制備方法。

背景技術

吉利柘樹素B（Gericudranin?B），是一種黃酮醇類化合物，分子式：C₂₉H₂₄O₉，分子量：410.38，黃色粉末，mp174℃。吉利柘樹素B主要存在于?？?Moraceae)柘樹Cudrania?tricuspidata?Bureau的莖皮中。

現代藥理研究表明，吉利柘樹素A具有細胞毒活性。對人型腫瘤細胞的ED₅₀(μg/ml)為皮膚癌CRL1579為13.12，皮膚癌L0X-IMVI為31.26，白血病MOLT-4F為23.07，結腸癌KM12為28.05，腎癌UO-31為9.78。

經文獻檢索，尚無適用于高純度吉利柘樹素B的提取純化方法報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種吉利柘樹素B的制備方法，該方法具有工藝簡單，提取完全，高效節能的優點。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種吉利柘樹素B的制備方法，其特征在于：以柘樹莖皮為原料，采用超臨界二氧化碳萃取，解析液加入活性炭回流脫色，脫色液加入超濾膜超濾，透過液再加入納濾膜濃縮，濃縮液加水分散，加入聚酰胺柱吸附，先用水洗脫，再用5-7BV50%乙醇溶液洗脫，收集高濃度流分，減壓濃縮，濃縮液采用制備型高效液相色譜儀進行分離純化，收集目標流分，濃縮至小體積，放置結晶，濾出結晶，干燥即得吉利柘樹素B產品。

所述超臨界二氧化碳萃取溫度為38-50℃，萃取壓力為30-42MPa，萃取時間為1-2h，二氧化碳流量為3-5ml/g原料/min，夾帶劑為65-80%乙醇，用量是占總萃取溶劑的體積百分比為5-8%。

所述活性炭為藥用活性炭，用量占原料質量的0.3-0.8%。

所述超濾膜為截留分子量2000-5000的中空纖維素超濾膜，納濾膜為截留分子量200-300的中空纖維素納濾膜。

所述高效液相色譜以反相鍵合硅膠為固定相，甲醇水溶液為流動相。

本發明的優勢在于：本發明方法簡單易行，超臨界萃取提取率高；膜過濾技術進行分子截留，屬于物理方法，常溫下進行，既實現了除雜，又濃縮了物料，過程中不造成成分分解，操作簡單，耗能少；采用聚酰胺樹脂對萃取液純化，樹脂處理量大，洗脫溶劑簡單，樹脂可重復利用；所用的反相高效液相制備色譜，具有分離度高、重現性好、分離時間短、制備量大等優點，分離的到產品純度可達98%以上。

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施例。

實施例1：

將柘樹莖皮粉碎，取1kg，置于萃取器中，以70%乙醇溶液作為夾帶劑，用量是占總萃取溶劑的體積百分比為8%，進行超臨界二氧化碳萃取，萃取溫度為48℃，萃取壓力為42MPa，萃取時間為2h，二氧化碳流量為4ml/g原料/min，解析液加入8g藥用活性炭回流脫色，脫色液加入截留分子量5000的中空纖維素超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量300的中空纖維素納濾膜濃縮，濃縮液加水分散，加入聚酰胺吸附，先用水洗脫，再用5BV50%乙醇溶液洗脫，收集高濃度流分，減壓濃縮，濃縮液用制備型高效液相色譜儀進行分離純化，以C18反相鍵合硅膠為固定相，55%甲醇水溶液為流動相，紫外在線監測，檢測波長為297nm，收集目標流分，濃縮至小體積，放置結晶，濾出結晶，干燥即得吉利柘樹素B產品，含量98.6%。

實施例2：

將柘樹莖皮粉碎，取1kg，置于萃取器中，以80%乙醇溶液作為夾帶劑，用量是占總萃取溶劑的體積百分比為5%，進行超臨界二氧化碳萃取，萃取溫度為38℃，萃取壓力為30MPa，萃取時間為1h，二氧化碳流量為5ml/g原料/min，解析液加入5g藥用活性炭回流脫色，脫色液加入截留分子量3000的中空纖維素超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量200的中空纖維素納濾膜濃縮，濃縮液加水分散，加入聚酰胺吸附，先用水洗脫，再用6BV50%乙醇溶液洗脫，收集高濃度流分，減壓濃縮，濃縮液用制備型高效液相色譜儀進行分離純化，以C18反相鍵合硅膠為固定相，55%甲醇水溶液為流動相，紫外在線監測，檢測波長為297nm，收集目標流分，濃縮至小體積，放置結晶，濾出結晶，干燥即得吉利柘樹素B產品，含量99.1%。

實施例3：