[發明專利]一種全能花堿的制備方法

無效

• 申請號: 201210368977.X
• 申請日: 2012-09-27
• 公開（公告）號: CN102850362A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 蘇劉花
• 申請（專利權）人: 南京澤朗農業發展有限公司
• 主分類號: C07D491/056
• 分類號: C07D491/056
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種全能花堿的制備方法，特別是涉及一種閃式提取全能花堿的方法。

背景技術

全能花堿（Pancratistatin），分子式C₁₄H₁₅NO₈，分子量325.27。全能花堿是從石蒜科全能花屬植物濱生全能花Pancratium?littorale?Jacq.的鱗莖中提取分離的一種生物堿類化合物。實驗研究表明，全能花堿具有：1.細胞毒活性。對鼠P388非常有效，其ED₅₀(體外)為0.01μg/ml；體內在0.75-12.5mg/kg時，延命率38%-106%，對鼠卵巢肉瘤M-5076也有效。2.抗RNA病毒活性。對感染乙腦小鼠注射本品后，存活率增加100%，對黃熱病病毒和本雅病毒(bunyaviruses)也有效。3.植物生長抑制劑。抑制種子發芽和植物根的生長。4.抗腫瘤活性。最敏感為黑素瘤株，其次為腦、結腸、肺、腎腫瘤。

目前，國內尚未見全能花堿的提取純化方法方面的報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種全能花堿的制備方法，該方法工藝簡單、快速、重現性好。易于產業化放大。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種全能花堿的制備方法，其特征在于包含以下步驟：

（1）取濱生全能花干燥鱗莖，用1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入閃式提取器中，以85-95%乙醇溶液為提取溶劑，進行閃式提取，過濾得到提取液；

（2）上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮；

（3）將上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監測，收集全能花堿組分，將洗脫液旋轉蒸發濃縮，干燥即得產品。

所述步驟（1）中閃式提取電壓為140-160V，提取時間為90s-120s。

所述步驟（2）中氧化鋁為80-100目，氯仿-丙酮體積比為1:1，用量為柱體積的4-8倍。

所述步驟（3）中制備型液相色譜的流動相為乙腈-0.2%乙二胺水溶液，體積比為45：55，紫外檢測波長為278nm。

本發明的特點是采用閃式提取、柱層析與制備型液相色譜法相結合技術制備全能花堿，高效節能，生產周期短，易于產業化。

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

取濱生全能花干燥鱗莖200g，用1%氨水浸泡4h，晾干，加入閃式提取器中，以90%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為140V，提取時間為90s，進行閃式提取，過濾得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁（100目）拌勻、干燥后裝柱，用7倍柱體積的氯仿-丙酮（1:1）混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經0.45μm微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以乙腈-0.2%乙二胺水溶液為流動相，體積比為45：55，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10μm，柱長為15cm、直徑為4cm，六通閥進樣，進樣體積為25ml，控制流速為50ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為278nm，收集目標成分，減壓回收試劑得全能花堿42mg，經HPLC檢測，純度76.5%。

實施例2：

取濱生全能花干燥鱗莖500g，用1%氨水浸泡5h，晾干，加入閃式提取器中，以90%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為150V，提取時間為100s，進行閃式提取，過濾得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁（100目）拌勻、干燥后裝柱，用8倍柱體積的氯仿-丙酮（1:1）混合溶液洗脫，薄層檢測，收集全能花堿流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經0.45μm微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以乙腈-0.2%乙二胺水溶液為流動相，體積比為45：55，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10μm，柱長為15cm、直徑為4cm，六通閥進樣，進樣體積為25ml，控制流速為50ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為278nm，收集目標成分，減壓回收試劑得全能花堿97mg，經HPLC檢測，純度79.4%。

實施例3：