[發明專利]一種厚花番荔枝靈的制備方法

無效

• 申請號: 201210368362.7
• 申請日: 2012-09-28
• 公開（公告）號: CN102827114A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 劉東鋒;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京澤朗醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D307/58
• 分類號: C07D307/58
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥提取分離技術領域，涉及一種從厚花番荔枝種子中分離制備厚花番荔枝靈的方法。

背景技術

厚花番荔枝靈，白色無定形粉末，來源于番荔枝科植物厚花番荔枝Annona?crassiflora的種子。厚花番荔枝種子主要有效成分為乙酰精寧類化合物，以厚花番荔枝靈為主。厚花番荔枝靈具有抗腫瘤活性，對下列腫瘤細胞的ED50(μg/ml)為：A-549(0.006)；HT-29(0.6)；MCF-7(0.004)；RPMI-7951(0.001)；U-251(0.01)。其作用強度與阿霉素相當。

目前，番荔枝科植物次生代謝物番荔枝乙酰精寧類（annonanceous?acetogenins，AAGs）化合物被視為新的抗腫瘤藥物的潛在資源，AAGs能抑制人卵巢瘤IA9細胞復制、誘導癌細胞凋亡，是強效的復合物I抑制劑，抗腫瘤藥物的候選藥物。

目前，尚未見高含量厚花番荔枝靈的制備方法相關專利報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種厚花番荔枝靈的制備方法。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：

（1）取厚花番荔枝種子，超臨界二氧化碳流體萃取藥材中的油脂類物質；

（2）脫脂藥材加6-8倍80-90%乙醇溶液，在30-45℃的溫度下，進行連續逆流超聲提取30-70min，過濾得到提取液，濃縮干燥得粗提物；

（3）采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的厚花番荔枝靈，其兩相溶劑系統為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗提物由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集厚花番荔枝靈組分；

（4）將厚花番荔枝靈組分進行真空濃縮，析出結晶，濾出結晶，加入乙酸乙酯回流溶解，放置重結晶，過濾、洗滌干燥即得厚花番荔枝靈。

所述步驟（1）中所述超臨界萃取溫度為35-45℃，壓力為25-30MPa，時間為20-50min。

所述步驟（2）中超聲頻率為40-60KHz。

所述步驟（3）中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統的體積比為4-7:3-4:5-7:2-3。

本方法積極效果是：

（1）本方法采用超臨界流體萃取技術脫除油脂類物質，高效環保；

（2）本方法采用連續逆流超聲提取，實現了超聲提取和連續逆流提取同時進行，提取效果好，同時實現連續作業；

（3）本方法采用高速逆流色譜法，收率高、制備量大、制備周期短，解決了柱層析效率低而且污染嚴重的技術缺陷；

具體實施方式：

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

實施例1：

取厚花番荔枝種子，取1kg，放入超臨界萃取裝置中，萃取溫度為35℃，萃取壓力為30MPa，CO₂流量為15L/h，萃取20min，殘留物加6倍90%乙醇溶液在45℃的溫度下進行連續逆流超聲提取30min，超聲頻率為60KHz，過濾，得到提取液，減壓濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的厚花番荔枝靈，以體積比5:4:6:2石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水為兩相溶劑系統，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗提物由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集厚花番荔枝靈組分，進行真空濃縮，析出結晶，濾出結晶，加入乙酸乙酯回流溶解，放置重結晶，過濾、洗滌干燥即得厚花番荔枝靈，含量98.1%。

實施例2：

取厚花番荔枝種子，取1kg，放入超臨界萃取裝置中，萃取溫度為45℃，萃取壓力為29MPa，CO₂流量為15L/h，萃取50min，殘留物加8倍80%乙醇溶液在30℃的溫度下進行連續逆流超聲提取70min，超聲頻率為60KHz，過濾，得到提取液，減壓濃縮干燥，得粗提物；采用高速逆流色譜法分離純化粗提物中的厚花番荔枝靈，以體積比7:4:7:2石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水為兩相溶劑系統，上相注滿高速逆流色譜柱為固定相，轉動主機，泵入下相做流動相，流動相溶解粗提物由進樣閥進樣，紫外檢測器在線監測，收集厚花番荔枝靈組分，進行真空濃縮，析出結晶，濾出結晶，加入乙酸乙酯回流溶解，放置重結晶，過濾、洗滌干燥即得厚花番荔枝靈，含量97.4%。

實施例3：