[發明專利]Brevilin A作為JAK-STATs信號靶向抑制劑的應用

有效

• 申請號: 201210368361.2
• 申請日: 2012-09-28
• 公開（公告）號: CN102836151A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 趙晨陽;陳星;杜宇平;楊金波;王勤
• 申請（專利權）人: 白銀博賽寧生物科技有限公司
• 主分類號: A61K31/365
• 分類號: A61K31/365;A61P35/00
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 張英荷

技術領域

本發明屬于醫藥應用領域，涉及一種?Brevilin?A?的醫藥新用途，尤其涉及Brevilin?A?作為?JAK-STATs?信號靶向抑制劑的應用。

背景技術

?細胞中JAK-STATs信號對細胞信號的傳導及各項生理活動至關重要，該家族信號的異常會導致眾多疾病的發生，包括癌癥和免疫相關疾病。JAKs（Janus?Kinase）家族包括JAK1,JAK2,JAK3和Tyk2四個成員。而JAKs下游的STATs（Signal?transducer?and?activator?of?transcription）家族包含7個成員（STAT1-STAT6，其中STAT5A?和STAT5B有兩個獨立的基因編碼）。在許多人類實體瘤及血液相關疾病中，通常STATs活性表現為異常，最常見的為STAT3過度活（Bowman?et?al.,?2000;?Garcia?and?Jove,?1998;?Yu?et?al.,?2009）。

????在眾多STAT3異?；罨哪[瘤細胞中，抑制STAT3信號能有效抑制細胞生長、誘導細胞凋亡和減少腫瘤細胞的轉移（Iwamaru?et?al.,?2007;?Rahaman?et?al.,?2002）。如在神經膠質瘤（Iwamaru?et?al.,?2007;?Rahaman?et?al.,?2002）、乳腺癌（Garcia?et?al.,?2001）、結腸癌）、前列腺癌），黑色素瘤（Niu?et?al.,?2002;?Niu?et?al.,?1999）等細胞中，通過STAT3抑制蛋白表達、小干擾?RNA或特異性抑制劑來抑制STAT3抑制劑，能顯著下調STAT3下游相關基因，如CyclinD1、Bcl-xl、c-Myc、Survivin等，從而調節腫瘤細胞周期減緩細胞增殖，增加凋亡（Weerasinghe?et?al.,?2007;?Zhang?et?al.,?2012）。作為?STATs?家族上游最重要的激酶，由于突變或其他原因引起的JAKs活性過高,持續激活下游蛋白（主要如STATs家族），與上述腫瘤疾病相關外，通常會與血液疾病、自身免疫疾病相關（Baxter?et?al.,?2005;?James?et?al.,?2005;?Kralovics?et?al.,?2005;?Levine?et?al.,?2005;?Mullighan?et?al.,?2009）。綜上所述在這些相關的疾病中，抑制JAK-STATs?信號將有效抑制和緩解該信號異常活化帶來的疾病。

Brevilin?A是一種天然產物，可從鵝不食草、短葉老鶴草等天然植物中提取，其結構為：

?中國專利申請201110423357.7公開了一種以STAT3為靶點的藥物篩選細胞模型及其構建和應用，在篩選相關抑制劑的過程中，發現?Brevilin?A?能有效抑制所選用篩藥模型中的熒光素酶活性，經過進一步驗證發現，Brevilin?A?對?JAK-STATs?信號特別是?JAKs?家族激酶活性及下游STAT3有穩定的抑制效果，且在細胞水平具有高效低毒的抑制效果，能對STAT3信號依賴的細胞具有較好的抑制作用。由于Brevilin?A本身是天然中草藥的成分，其副作用在可控范圍之內，故作為JAK-STATs信號抑制劑有很大潛力開發成藥物，治療由于JAK-STATs持續活化造成的相關疾病。

發明內容

本發明的目的是提供一種?Brevilin?A?的新用途——Brevilin?A作為JAK-STATs?信號抑制劑的應用。

下面以STAT3為例，通過細胞實驗來說明Brevilin?A對JAK-STATs信號的抑制作用。

儀器：PerkinElmer?Victor3?熒光/化學發光分析儀，?Biorad?蛋白質電泳及轉印系統，Biorad熒光定量PCR分析儀。

試劑：螢火蟲熒光素酶測定試劑盒以及RNA反轉錄試劑盒購自Promega公司；IL-6購自Peprotech公司；Brevilin?A購自BioBioPha?公司；DMEM（高糖）及胎牛血清購自Hyclone（Thermo公司）；各種抗體購自Cell?Signaling?Technology公司；總RNA提取試劑盒購自天根公司；MTT購自上海生工。

1、不同濃度?BrevlinA?對?STAT3?活性的抑制實驗