[發明專利]一種高雄山蟲草子實體低產孢菌株及子實體人工培養方法

有效

• 申請號: 201210368161.7
• 申請日: 2012-09-28
• 公開（公告）號: CN103004463A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 梁建東;田維毅;王平;韓潔;何光志;王文佳;蔡琨
• 申請（專利權）人: 貴陽中醫學院
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 北京聯創佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 張浩宇

技術領域

本發明涉及一種微生物及其子實體的人工培養方法，尤其是一種高雄山蟲草低產孢菌株及其子實體的人工培養方法，屬于真菌培養技術領域。?

背景技術

高雄山蟲草Cordyceps?takaomontana?Yakush.&Kumaz.1941（=Isaria?tenuipes?peck（1879）=Isaria?japonica?Yasuda（1915）=Paecilomyces?tenuipes(Peck)Samson（1974）=Paecilomyces?japonica）是一種優良的蟲草資源，它在抗癌、抗抑郁、抗蟲、抗菌、抗病毒及調節免疫力等方面有明顯作用。它的抗癌成分乙酰環氧單端孢烯二醇（4β-acetoxyscirpene-3α,15-diol＝AETD）的抗癌活性比目前用于臨床癌癥病患者治療用的順鉑強約4-6倍,且毒性低，安全范圍大。因此，高雄山蟲草無論作為藥物開發還是作為保健品應用都具有廣闊前景。在韓國，高雄山蟲草已經應用于食品及保健品中。由于高雄山蟲草的野生資源稀少，利用人工培養生產其子實體，是對高雄山蟲草進行人工開發的必由之路。?

但目前在高雄山蟲草人工培養中存在的主要問題之一是在子實體生長過程中會產生大量的分生孢子，當這些分生孢子大量存在時，對提高蟲草子實體產量和生產人員的健康安全都造成了較大影響，因?此，尋找低產孢的高雄山蟲草菌株和人工培養方法是當前高雄山蟲草子實體人工培養中重點需要解決的問題。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于，提供一種高雄山蟲草子實體低產孢菌株及子實體的人工培養方法。在該人工培養方法下該菌株可發育形成產孢極低的子實體，在高雄山蟲草的人工培養中具有良好的應用前景。?

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：?

本發明提供的高雄山蟲草，屬于糞殼菌綱、肉座菌目、麥角菌科、蟲草屬，菌株為高雄山蟲草子實體低產孢菌株A1105（Cordyceps??takaomontana?A1105)，菌株保藏號為：CCTCC?M?2012307，于2012年8月9日在中國典型培養物保藏中心（地址：中國.武漢.武漢大學）保藏。

上述的高雄山蟲草子實體低產孢菌株A1105分離自罹病昆蟲標本，在Czapek瓊脂培養基上，25℃下培養21天時，菌落平均直徑為32mm，正面白色到肉色，粉質，背面白色到褐色，菌落平展、薄，邊緣整齊，未見形成環帶或放射溝，未見角變現象，未見形成孢梗束。?

本發明的高雄山蟲草低產孢子實體人工培養方法，包含以下步驟：?

（1）人工培養基制備：取去皮的小麥粒100g，用清潔水浸泡12h，濾去多余水分后放入培養盒內，采用高壓間歇滅菌法滅菌2-3次備用，每次滅菌溫度控制在115℃，時間控制在40min；?

（2）將A1105菌株搖瓶培養制成種子液，向培養基上接種種子液45ml，置于25℃下暗培養10天左右，見有轉色跡象時，轉入16?℃和22℃下，交替變溫培養各12h；其中在22℃時，見光培養12h，光照強度為200xl，在16℃時，暗培養12h；25天后即可收獲子實體。?

上述的高雄山蟲草低產孢子實體人工培養方法中，步驟（1）所述培養盒體積為13cm×8cm×11cm，步驟（2）所述培養基體積為13cm×8cm×3.5cm。?

前述的高雄山蟲草低產孢子實體人工培養方法中，步驟（2）所述A1105菌株搖瓶培養的溫度為25℃，轉速250r/min，培養4天，菌絲段達10⁷ml^-1。?

前述的高雄山蟲草低產孢子實體人工培養方法中，在步驟（2）所述子實體第一次收獲后補水，按照與第一次培養相同的方法，進行二次培養，共計可收獲近雙倍產量。?

有益效果：與現有技術相比，本發明提供的是一種高雄山蟲草子實體低產孢菌株及子實體的人工培養方法，在該人工培養方法下該菌株可發育形成產孢極低的子實體，有效解決了現有技術在高雄山蟲草人工培養中，子實體生長過程中會產生大量分生孢子的技術難題，保障了生產人員的健康安全，同時也提高了高雄山蟲草子實體的產量，在高雄山蟲草的人工培養中有良好的應用前景。?

附圖說明

圖1是本發明的高雄山蟲草菌株A1105在Czapek瓊脂培養基上培養性狀（正面）；?

圖2是本發明的高雄山蟲草菌株A1105在Czapek瓊脂培養基上培養性狀（背面）；?

圖3是采用本發明的菌株及方法培養獲得的高雄山蟲草子實體。?