[發明專利]專用于PCR技術三溫度計量量值傳遞測試裝置的制作方法

無效

• 申請號: 201210365234.7
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN102879128A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 吳堅;宣勝藍;陳濤;劉世炳
• 申請（專利權）人: 北京工業大學
• 主分類號: G01K15/00
• 分類號: G01K15/00
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 劉萍

技術領域

本發明涉及一種對PCR技術三溫度計量量值傳遞的裝置的制作方法，主要用于對PCR熒光檢測儀中溫度傳感器的計量工作，屬于計量學、儀器儀表檢測領域。

背景技術

聚合酶鏈式反應（PCR）是一種在體外模擬自然DNA復制過程的核酸擴增技術，由高溫熱變性（94℃左右）、低溫退火復性（50~60℃）和適溫延伸（72℃）組成一個周期，一個循環可以使DNA的基因片段總量（按2的N次方）增加，可以把至少一個特異基因片段迅速擴增，這樣一來可以使用基于FRET（熒光共振能量傳遞技術）進行熒光實時檢測，根據熒光強度以及強度相對變化的信息，可對PCR產物進行定性定量分析。PCR技術的實用性，使得其應用廣泛，多用于醫學應用來檢測細菌、病毒類疾病；診斷遺傳疾病；診斷腫瘤；應用于法醫物證學。

如今市場上應用PCR技術的儀器有很多，有常見的PCR擴增儀，將PCR試劑擴增后再用凝膠電泳的方法進行產物檢測，還有實時熒光PCR檢測儀，在反應物基團里加入熒光對，可進行實時反應物檢測。目前為止,?市場上的PCR儀國外的品牌主要有ABI、?Roche、?MJ、?Bio-?Rad、?Stratagene、?Corbtt、?Cepheid等,?國內的杭州博日、?廣州達安基因和上海楓嶺等。

這類儀器的關鍵技術之一是，溫度循環的控制，PCR反應中高溫熱變性、低溫退火和室溫延伸三個溫度點要能精確控制，這就取決于其溫度傳感器的精確性。市面上常用的溫度傳感器有兩類，一種集成數字化傳感器，如DS18B20，它具有獨特的單總線接口方式，僅需使用1?個端口就能實現與單片機的雙向通訊。但是其體積大，不適宜微體積的測量，精度相對較低。另一類常見的有熱電偶和熱電阻，熱電偶價格便宜，但精度低，需冷端補償，電路設計復雜；熱電阻精度較高，但需要標準溫度電阻與之匹配才能使用。

熱電阻是一種非線性的電阻材料，在其精度要求不高時可用其線性方程進行計算，但到實際生產標準儀器時就需要對其定標，傳感器的定標需要到當地計量部門進行標準化操作，但在PCR儀內我們只需要三個溫度值的定標結果，如果進行全溫度區的定標不但價格昂貴，給儀器生產增加成本，而且浪費資源。在計量檢定中，通常將高一等級(根據準確度高低所劃分的等級或級別)的計量標準復現的量值作為實際值，用它來校準其他等級的計量標準或工作計量器具，或為其定值。這是計量學中的量值傳遞的方法。各種計量的目的的不同，所要求的計量準確度也不一樣。當計量誤差滿足規定的準確度要求時，則可認為計量結果所得量值接近于真值，可用來代替真值使用，稱為“實際值”。

發明內容

本發明涉及一種專用于PCR技術三溫度計量量值傳遞的裝置，主要用于對PCR熒光檢測儀中溫度傳感器的計量工作。目前，溫度傳感器的定標都需要去計量部門進行，我們采取量值傳遞的方法，把在計量部門定標過的溫度傳感器作為高一等級標準，校準其他傳感器。

為了達到上述目的，本發明采取以下技術方案：

一種專用于PCR技術三溫度計量量值傳遞的裝置的制作方法，該裝置包括三部分：夾具部分，夾具部分包括有底座的夾柱，夾柱上端開有凹槽，側端開有螺孔，凹槽內夾有已定標溫度傳感器，待定標傳感器；加熱降溫部分，加熱降溫部分前后方向為陶瓷制冷片，兩側為加熱片；控制顯示部分，控制顯示部分包括有作為溫度開啟控制功能的表頭，已校準的表頭，待校準的表頭；

其制作方法為夾具部分將已定標的溫度傳感器與待定標的溫度傳感器固定在一起，使用螺釘通過螺孔調節松緊度；前后方向的陶瓷制冷片與兩側加熱片拼接成長方體的四個側面，然后與夾具部分通過導熱膠粘連在一起，并填充縫隙后成為可加載液體的直筒；陶瓷制冷片和加熱片連接溫度開啟控制功能的表頭，通過表頭中電路控制溫度的開啟與升降；已定標的溫度傳感器連接已校準的表頭，待定標的溫度傳感器連接待校準的表頭。

一種專用于PCR技術三溫度計量量值傳遞的裝置是一種通過量值傳遞的方法對未定標的溫度傳感器進行定標，兩個傳感器緊貼在一起，測量溫度點是一致的，已校準的表頭的顯示當前溫度與已定標的溫度傳感器的電阻，待校準的表頭的顯示待定標的溫度傳感器的電阻，通過待校準的表頭8的控制鍵盤調節溫度顯示與已校準的表頭一致，即完成一個溫度點的定標。采用量值傳遞的方法進行定標，準確性符合計量學標準，專用于PCR技術三溫度計量量值傳遞的裝置采用這種方法方便、準確，可根據自己需求定標相應的溫度點，具有自主性。

附圖說明

圖1　專用于PCR技術三溫度計量量值傳遞的裝置的夾具部分示意圖