[發(fā)明專(zhuān)利]海鮮菇液體菌種發(fā)酵工藝方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210364774.3
• 申請(qǐng)日: 2012-09-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102845225A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉克東;盧欽寶;侯有福;張娟;胥寶剛;錢(qián)立雙;溫麗君;劉振濤;楊華威
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 濟(jì)南蓬生農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01G1/04
• 分類(lèi)號(hào): A01G1/04
• 代理公司: 濟(jì)南誠(chéng)智商標(biāo)專(zhuān)利事務(wù)所有限公司 37105
• 代理人: 王汝銀

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)生物工程領(lǐng)域，具體的說(shuō)是一種海鮮菇液體菌種發(fā)酵工藝方法。

背景技術(shù)

海鮮菇，學(xué)名［Hypsizygus?marmoreus?(Peck)?H.E.Bigelow］，中文名：真姬菇，又名玉蕈、斑玉蕈，質(zhì)地脆嫩，味道鮮美，具有海蟹味，在日本稱(chēng)之為“蟹味菇”、“海鮮菇”。海鮮菇營(yíng)養(yǎng)豐富，是近年來(lái)十分具有商業(yè)潛力的食用菌品，目前多為工廠化栽培。

現(xiàn)階段海鮮菇的栽培是固體菌種栽培法，在試管中的固體斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)好菌種之后直接從試管中接入菌包中，上述固體菌種栽培法接種時(shí)完全依靠人工，效率較低。此外，固體菌種培養(yǎng)過(guò)程是靜止的，在靜止的條件下，在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周?chē)纬赏高^(guò)養(yǎng)分的壁障，養(yǎng)分的攝入受到阻礙，導(dǎo)致菌種的活力低，培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，間接導(dǎo)致提高了成本。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種海鮮菇液體菌種發(fā)酵工藝方法，該方法具有培養(yǎng)時(shí)間短、菌種活力強(qiáng)、接種效率高的特點(diǎn)。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采取的技術(shù)方案是：海鮮菇液體菌種發(fā)酵工藝方法，其特征是，包括以下步驟：

（1）培養(yǎng)試管種；將海鮮菇的純菌種接種在試管中的固體斜面培養(yǎng)基上，于21～23℃恒溫培養(yǎng)10～15天；

上述的固體斜面培養(yǎng)基由馬鈴薯、瓊脂、葡萄糖及蒸餾水構(gòu)成，馬鈴薯與蒸餾水的重量比為20%，瓊脂與蒸餾水的重量比為1.5～2.0%，葡萄糖與蒸餾水的重量比為2%，PH自然；

（2）將試管種轉(zhuǎn)移到搖瓶中；用接種鉤和接種鏟將試管中固體培養(yǎng)基上的菌種劃分為小塊，在無(wú)菌操作下將試管中的菌種接種到搖瓶中的液體培養(yǎng)基上，每個(gè)搖瓶中接種6～8塊；

上述的液體培養(yǎng)基由馬鈴薯、麩皮、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂及蒸餾水構(gòu)成，馬鈴薯與蒸餾水的重量比為20%，麩皮與蒸餾水的重量比為1.5～2.0%，葡萄糖與蒸餾水的重量比為2%，蛋白胨與蒸餾水的重量比為0.05～0.07%，磷酸二氫鉀與蒸餾水的重量比為0.2%，硫酸鎂與蒸餾水的重量比為0.05%，并根據(jù)液體培養(yǎng)基體積總量按照10毫克/升的含量添加入維生素B1，PH自然；

（3）在搖瓶中培養(yǎng)液體菌種；搖瓶中的菌種在21～23℃靜止培養(yǎng)3～4天后，觀察長(zhǎng)勢(shì)和有沒(méi)有污染雜菌，確定沒(méi)有染菌后放置于搖床上，搖床為旋轉(zhuǎn)式搖床，搖床的轉(zhuǎn)速為120～140轉(zhuǎn)/分；然后搖瓶中的菌種于搖床上21～23℃恒溫培養(yǎng)3～4天；

（4）將搖瓶中的菌種接種到發(fā)酵罐中；按照菌種與發(fā)酵罐的體積比為10%將菌種接種到發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐的內(nèi)壓為正壓且內(nèi)壓小于0.02兆帕，菌種在發(fā)酵罐中于21～23℃恒溫培養(yǎng)4～6天；

（5）將發(fā)酵罐中的菌種接入菌包；每一個(gè)菌包接入菌種的量為15～25毫升，終止發(fā)酵。

所述的固體斜面培養(yǎng)基的制作方法如下：

1）將馬鈴薯洗凈去皮，已發(fā)芽的要挖掉芽眼，按量稱(chēng)取后切成薄片，置于鋁鍋加水煮沸30分鐘，用4～6層紗布過(guò)濾取汁，加入按照重量比稱(chēng)取的蒸餾水；瓊脂按量稱(chēng)取，剪碎后加入馬鈴薯汁液內(nèi)，微火加熱，不時(shí)攪拌直至瓊脂全部溶化，再加入葡萄糖，煮3～6分鐘，其液汁裝入試管；

2）趁熱分裝入試管，裝量為試管長(zhǎng)度的1/4～1/5，緊塞棉塞，分裝時(shí)應(yīng)注意不使培養(yǎng)基黏附在試管口上，以免雜菌感染；

3）及時(shí)高壓滅菌，滅菌時(shí)將試管每7～10支扎成一捆，棉塞一端用牛皮紙包好，直立放入高壓鍋內(nèi)進(jìn)行蒸汽滅菌，當(dāng)壓力達(dá)0.05兆帕?xí)r，打開(kāi)排氣閥，使壓力降至“0”，繼續(xù)加熱，在0.110兆帕的壓力下保持30～35分鐘，待壓力表自動(dòng)降到“0”時(shí)再打開(kāi)鍋蓋，取出試管按照下述操作趁熱擺斜面；

4）試管取出后趁熱將試管口一端墊高，斜靠在桌上的小木棒上，使試管內(nèi)培養(yǎng)液斜面長(zhǎng)度達(dá)試管長(zhǎng)度的2/3～3/5，試管上面覆蓋毛巾，冷卻后即成斜面固體培養(yǎng)基；

5）滅菌后置常溫下48小時(shí)，未發(fā)現(xiàn)有雜菌產(chǎn)生，即可接種。

試管中固體培養(yǎng)基上的菌種劃分為小塊的體積大小為0.3立方厘米。

所述的液體培養(yǎng)基制作方法如下：

1）將馬鈴薯洗凈去皮，已發(fā)芽的要挖掉芽眼，按量稱(chēng)取后切成薄片；麩皮選用新鮮無(wú)霉變的大麩，按量稱(chēng)取后與馬鈴薯同煮，煮沸后文火維持20～30分鐘，用4～6層紗布過(guò)濾取汁，加入按照重量比稱(chēng)取的蒸餾水和其他原料煮沸然后分裝；

2）分裝入搖瓶，容量為1000毫升的搖瓶每瓶裝入500～600毫升，瓶口用棉塞、牛皮紙密封；