[發明專利]一種制備鷓鴣花物B的方法

無效

• 申請號: 201210363080.8
• 申請日: 2012-09-26
• 公開（公告）號: CN102863453A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 蘇劉花
• 申請（專利權）人: 南京澤朗農業發展有限公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥化學技術領域，涉及一種制備鷓鴣花物B的方法。

背景技術

鷓鴣花物B是從楝科（Meliaceae）植物羅卡鷓鴣花Trichilia?roka?Chiov.的莖皮中分離得到的一種三萜類化合物，呈白色無定形固體狀。分子式為C₃₅H₄₄O₁₄，分子量為688.72，目前對鷓鴣花物B的研究較少，1984年學者通過藥理實驗發現鷓鴣花物B具有昆蟲拒食活性，在200ppm時對日本疫病昆蟲根切蟲的幼蟲有拒食活性；另外還發現鷓鴣花物B對DNA修復缺損酵母株RS322K（rad?52Y）有中等抑制作用，其IC₅₀為13μg/ml。

目前，尚無大量制備鷓鴣花物B的工業化方法報道和專利公開。

發明內容

本發明的目的在于提供一種制備鷓鴣花物B的方法。

本發明提供的從羅卡鷓鴣花莖皮中提取制備鷓鴣花物B的方法步驟如下：

（1）將羅卡鷓鴣花莖皮粉碎，用乙醇水溶液滲漉提取，將提取液減壓濃縮得到浸膏；

（2）將浸膏用乙酸乙酯和水的混合溶液溶解，過濾，乙酸乙酯和水的體積比為10:1，濾液靜置分層15-28h，分液，取上相，減壓濃縮蒸干得到乙酸乙酯萃取物；

（3）將乙酸乙酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液溶解，過濾，庚烷和甲醇的體積比為2:1，濾液靜置分層5-8h，分液，取下相，減壓濃縮蒸干得到甲醇萃取物；

（4）甲醇萃取物通過硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯為洗脫劑進行梯度洗脫，將含有鷓鴣花物B的流分通過葡聚糖凝膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇體積比為4:1的混合溶液進一步洗脫純化，得到鷓鴣花物B。

步驟（1）中所述乙醇水溶液為體積百分比為60-85%的乙醇水溶液，其用量是所用藥材重量的5-15倍，藥材的浸泡時間為2-8小時，滲漉提取時間為2-5小時。

步驟（4）中所述石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫是按石油醚-乙酸乙酯體積比5:1、3:1、1:1、1:2進行梯度洗脫。

本發明的特點在于：通過乙酸乙酯-水和庚烷-甲醇體系的分配，可提高鷓鴣花物B的萃取率；經硅膠柱和葡聚糖凝膠柱層析，可得到高純度的鷓鴣花物B，本發明的鷓鴣花物B的制備方法，具有提取工藝簡單，成本低、提率高，制備得到的鷓鴣花物B單體純度高等特點，適用于工業化生產。

具體實施方式：

下面結合實施例對本發明作進一步闡述，但本發明不限于此。

實施例1：

將50kg干燥的羅卡鷓鴣花莖皮粉碎成粗粉，先用少量60%乙醇浸泡4小時，再用原料重量5倍的60%乙醇水溶液滲漉提取，提取時間為4小時，收集滲漉液濃縮得到浸膏。將浸膏用乙酸乙酯和水的混合溶液（乙酸乙酯和水的體積比為10:1）攪拌溶解，過濾，濾液靜置分層15h，分液，取上相，減壓濃縮蒸干得到乙酸乙酯萃取物。將乙酸乙酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液（庚烷和甲醇的體積比為2:1）攪拌溶解，過濾，濾液靜置分層8h，分液，取下相，減壓濃縮蒸干得到甲醇萃取物。將甲醇萃取物通過硅膠柱層析（甲醇萃取物與硅膠用量之比為1:3），按石油醚-乙酸乙酯體積比5:1、3:1、1:1、1:2進行梯度洗脫，每個梯度用量為600ml，收集含鷓鴣花物B的流分通過葡聚糖凝膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇體積比為4:1的混合溶液進一步洗脫純化，洗脫液減壓濃縮干燥得到鷓鴣花物B119mg，純度為90.8%。

實施例2：

將50kg干燥的羅卡鷓鴣花莖皮粉碎成粗粉，先用少量80%乙醇浸泡2小時，再用原料重量8倍的80%乙醇水溶液滲漉提取，提取時間為2小時，收集滲漉液濃縮得到浸膏。將浸膏用乙酸乙酯和水的混合溶液（乙酸乙酯和水的體積比為10:1）攪拌溶解，過濾，濾液靜置分層28h，分液，取上相，減壓濃縮蒸干得到乙酸乙酯萃取物。將乙酸乙酯萃取物用庚烷和甲醇的混合溶液（庚烷和甲醇的體積比為2:1）攪拌溶解，過濾，濾液靜置分層6h，分液，取下相，減壓濃縮蒸干得到甲醇萃取物。將甲醇萃取物通過硅膠柱層析（甲醇萃取物與硅膠用量之比為1:3），按石油醚-乙酸乙酯體積比5:1、3:1、1:1、1:2進行梯度洗脫，每個梯度用量為600ml，收集含鷓鴣花物B的流分通過葡聚糖凝膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇體積比為4:1的混合溶液進一步洗脫純化，洗脫液減壓濃縮干燥得到鷓鴣花物B103mg，純度為93.6%。

實施例3：