[發明專利]一種治療腰椎間盤突出的注射劑的制備方法及檢測方法

在審

• 申請號: 201210362256.8
• 申請日: 2012-09-25
• 公開（公告）號: CN103655687A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 董根榮
• 申請（專利權）人: 董根榮
• 主分類號: A61K36/51
• 分類號: A61K36/51;A61K9/19;A61K9/08;A61P19/08;G01N30/90;G01N30/02;A61K35/56
• 代理公司: 杭州新源專利事務所 33234
• 代理人: 李大剛

1.一種治療腰椎間盤突出的注射劑的制備方法，其特征在于，按重量份計算，取牛膝10～25份、杜仲5～10份、桑寄生20～35份和秦艽10～25份，加入60%～90%乙醇溶液，乙醇溶液的用量為6～8倍，滲漉提取，過濾，合并醇液，減壓回收乙醇并濃縮成相對密度為1.1～1.5的浸膏；加2～3倍水加熱到40～60℃攪拌溶解，加入有機溶劑進行萃取，回收溶劑，濃縮干燥得牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物；按重量份計算，取地龍10～15份，加水煎煮兩次，每次加水6～9倍量，煎煮2～3.5小時，合并兩次煎煮液濃縮成1.1～1.5的浸膏；將浸膏加90％～95％的乙醇，攪拌、沉淀回收乙醇并濃縮，在45～50℃下干澡、粉碎成粉，得地龍提取物；將牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物、秦艽提取物和地龍提取物混合并加入適當的輔料制備成凍干粉針劑或輸液劑。

2.根據權利要求1所述的治療腰椎間盤突出的注射劑的制備方法，其特征在于，按重量份計算，取牛膝18份、杜仲8份、桑寄生25份和秦艽18份，加入60%～90%乙醇溶液，乙醇溶液的用量為6～8倍，滲漉提取，過濾，合并醇液，減壓回收乙醇并濃縮成相對密度為1.1～1.5的浸膏；加2～3倍水加熱到40～60℃攪拌溶解，加入有機溶劑進行萃取，回收溶劑，濃縮干燥得牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物；按重量份計算，取地龍12份，加水煎煮兩次，每次加水6～9倍量，煎煮2～3.5小時，合并兩次煎煮液濃縮成1.1～1.5的浸膏；將浸膏加90％～95％的乙醇，攪拌、沉淀回收乙醇并濃縮，在45～50℃下干澡、粉碎成粉，得地龍提取物；將牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物、秦艽提取物和地龍提取物混合并加入適當的輔料制備成凍干粉針劑或輸液劑。

3.根據權利要求1或2所述的治療腰椎間盤突出的注射劑的制備方法，其特征在于，取牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物、秦艽提取物和地龍提取物各5g加入2000ml注射用水中攪拌均勻，加入適量10%檸檬酸鈉溶液，攪拌至溶液完全溶解，調節pH值4.3～5，攪拌使之完全溶解，加入30ml聚乙二醇600、140g甘露醇，攪拌使之完全溶解，按照質量體積百分比加入0.05%的活性炭，65℃靜止吸附20分鐘后，過濾除碳，補加注射用水至全量，調節pH值4.3～5，精濾，中間體取樣，檢測合格后，取3ml灌裝于西林瓶中，半壓膠塞，裝入凍干機，冷凍干燥，箱內壓膠塞，出箱鎖鋁蓋，包裝即得凍干粉針劑。

4.根據權利要求1或2所述的治療腰椎間盤突出的注射劑的制備方法，其特征在于，取牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物各500mg加入600ml注射用水中攪拌均勻，再加入1.2g檸檬酸鈉和50ml丙二醇，攪勻，使之形成澄明溶液，再取300ml注射用水置配液器中，加入800mg酒石酸，再加入地龍提取物400mg，攪拌至形成澄明溶液，加入牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物溶液，再加注射用水至1000ml，測定pH值，用1%酒石酸或0.1MNaOH溶液調pH至4.5～5.3，加入45g葡萄糖，攪拌溶解，加入0.05%的活性炭煮沸，攪拌保溫20分鐘，過濾，三級微孔濾膜：按先后次序為：0.8um-0.45um-0.22um，過濾，加入注射用水稀釋，灌封，110℃滅菌1小時，即得葡萄糖輸液劑。

5.根據權利要求1或2所述的治療腰椎間盤突出的注射劑的制備方法，其特征在于，取牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物各500mg加入600ml注射用水中攪拌均勻，再加入1.2g檸檬酸鈉和50ml丙二醇，攪勻，使之形成澄明溶液，再取300ml注射用水置配液器中，加入800mg酒石酸，再加入地龍提取物400mg，攪拌至形成澄明溶液，加入牛膝提取物、杜仲提取物、桑寄生提取物和秦艽提取物溶液，再加注射用水至1000ml，測定pH值，用1%酒石酸或0.1MNaOH溶液調pH至4.5～5.3，加入70g氯化鈉，攪拌溶解，加入0.05%的活性炭煮沸，攪拌保溫20分鐘，過濾，三級微孔濾膜：按先后次序為：0.8um-0.45um-0.22um，過濾，加入注射用水稀釋，灌封，110℃滅菌1小時，即得氯化鈉輸液劑。

6.權利要求1～5任一所述的治療腰椎間盤突出的藥物制劑的檢測方法，其特征在于，包括：

（1）鑒別

（A）取本品或內容物適量研成細粉，取4g，加乙醇30ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加0.0lmol／L的氫氧化鈉溶液20ml，微熱使溶解，置分液漏斗中，加乙醚10ml，振搖提取，棄去乙醚液，水層再用醋酸乙酯10ml，振搖提取，醋酸乙酯提取液濃縮至約lml；作為供試品溶液，水層備用；或者直接取輸液劑1ml作為供試品溶液。另取紫莖牛膝甾酮對照品制成對照品溶液；照薄層色譜法，附錄VI?B試驗，吸取上述兩種溶液各10～15ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿：甲酸=5：l為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

(B)取備用的水層，加水飽和的正丁醇15ml，振搖提取，分取正丁醇提取液，用正丁醇飽和的水5ml洗滌，棄去水層液，正丁醇提取液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取蚯蚓解熱堿對照品適量，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法，附錄VI?B試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿：甲酸：水=7：3：0．5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

（C）取本品適量研成細粉，取10g，加75％乙醇l00ml，搖勻，加鹽酸10ml，置水浴中加熱回流3小時，取出，放冷，用60～90℃的石油醚振搖提取4次，每次需要的溶劑量為30ml，20ml，15ml，15ml，合并石油醚提取液，揮干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取秦艽對照藥材，同樣的方法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法，附錄VI?B試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷：醋酸乙酯=4：l為展開劑，二次展開，每次展距18cm，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加熱使斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。

（2）含量測定

照高效液相色譜法，《中國藥典》2000一部附錄VID測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇：水=55：45為流動相，用蒸發光散射檢測器檢測，理論塔板數按紫莖牛膝甾酮計算不低于2000；精密稱取經105℃干燥至恒重的紫莖牛膝甾酮對照品適量，加甲醇制成每lml含0.8mg的溶液，作為對照品溶液；取本品或內容物適量研成細粉，取2.0g，精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，用甲醇20m1分次洗滌殘渣和容器，洗液并入濾液中；將提取液回收甲醇至干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌2次，每次15ml；取正丁醇液，水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解并轉移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，離心，即得供試品溶液；分別精密吸取上述對照品溶液5ul、10ul，供試品溶液5～10ul，注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法對數方程計算含量。