[發(fā)明專利]雙功能共綴物的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210361925.X
• 申請日: 2011-05-27
• 公開（公告）號: CN103204901A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉剛;趙楠;馬瑤
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所;北京協(xié)和制藥二廠
• 主分類號: C07K5/037
• 分類號: C07K5/037;C07K1/113;A61K38/06;A61P35/00
• 代理公司: 北京三高永信知識產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11138
• 代理人: 何文彬

1.如式I所示的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的制備方法，

其中，當(dāng)A為苯基時，B為乙酰氧基；當(dāng)A為叔丁氧基時，B為羥基；

n為2至12的自然數(shù)；

X選自C1-6烷烴基、C1-6烯烴基、含有雜原子的C1-6烷烴基、或者X表示單鍵，即M和酰基直接相連；并且所述的雜原子選自氧原子、硫原子、氮原子。

M環(huán)選自芳基、雜芳基；

R選自氫、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷基、羥基、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷氧基、巰基、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷硫基、C1-6烷氧C1-6烷基、氨基、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷氨基、其中包括單烷氨基和雙烷氨基、醛基、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷酰基、羧基、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷酰氧基、氨基甲酰基、取代或非取代的C1-6直鏈或支鏈烷酰胺基、C2-6的烯烴、鹵素、硝基、氰基、C1-6直鏈或支鏈烷基上的取代基選自：羥基、巰基、氨基、醛基、羧基、氨基甲酰基、鹵素、硝基、氰基。

其特征在于，具體步驟如下：

1）液相合成紫杉醇或多西紫杉醇2′-O-烷烴基二酸單酯；

2）固相或液相合成胞壁酰二肽簡化物；

3）液相合成紫杉醇或多西紫杉醇與胞壁酰二肽簡化物的共綴物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，步驟1）中液相合成紫杉醇2′-O-烷烴二酸單酯包括如下具體步驟：

（1）首先，將紫杉醇，烷烴基二酸酐和4-N，N-二甲基吡啶溶于吡啶中，室溫攪拌4小時，反應(yīng)完畢；

（2）然后，先后以乙酸乙酯稀釋吡啶溶液，以飽和硫酸銅溶液洗滌乙酸乙酯相，以水洗滌乙酸乙酯相；

（3）最后，分離乙酸乙酯相，減壓濃縮溶劑，向少量殘余液中加入大量水，體系內(nèi)析出白色固體，過濾，冷凍干燥，得到目標(biāo)產(chǎn)物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，步驟1）中液相合成多西紫杉醇2′-O-烷烴二酸單酯包括如下具體步驟：

（1）首先，將多西紫杉醇，烷烴基二酸酐和4-N，N-二甲基吡啶溶于N，N-二甲基甲酰胺中，室溫攪拌2小時，反應(yīng)完畢；

（2）然后，先后以二氯甲烷稀釋N，N-二甲基甲酰胺溶液，以2N鹽酸水溶液洗滌二氯甲烷相，以水洗滌二氯甲烷相；

（3）最后，分離二氯甲烷相，減壓濃縮溶劑，用少量甲醇溶解殘余物，再加入大量水，體系內(nèi)析出白色固體，過濾，冷凍干燥，得到目標(biāo)產(chǎn)物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，其特征在于，步驟2）中固相或液相合成胞壁酰二肽簡化物包括具體步驟如下：

1）固相合成：

（1）首先，液相合成中間體Fmoc-D-iso-Gln-OH；

（2）然后，利用氨基樹脂Rink-AmideAM作為固相載體，通過多肽固相合成策略先后向樹脂引入氨基酸Fmoc-L-Lys(Boc)-COOH、Fmoc-D-iso-Gln-COOH、Fmoc-L-Ala-COOH和有機羧酸；縮合反應(yīng)為常規(guī)的酰胺縮合反應(yīng)，通過每次加入過量的上述三種氨基酸或有機羧酸之一和縮合劑HATU或HBTU或BOP或PyBOP中的任意一種可以使縮合反應(yīng)完全；反應(yīng)完成后，經(jīng)充分洗滌樹脂、裂解樹脂以及純化產(chǎn)物粗品等步驟，得到胞壁酰二肽簡化物；

2）液相合成：

（1）首先，合成中間體Boc-D-Glu(OBzl)-NH2和Boc-Lys(Z)-NH2；

（2）然后，用活潑酯法先后合成二肽片段Boc-Ala-D-Glu(OBzl)-NH2和三肽片段R-Ala-D-Glu(OBzl)-NH2，用氫溴酸的醋酸溶液或者其他酸性或者堿性條件脫除三肽片段的Bzl保護基，繼續(xù)用活潑酯法合成四肽R-Ala-D-iso-Gln-Lys(Z)-NH2；

（3）最后，用三氟化硼乙醚、三氟乙酸和乙硫醇混合溶液（體積比9：9：2）脫除Z保護基，得到產(chǎn)物粗品，純化后得到胞壁酰二肽簡化物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，固相合成方法種的氨基酸Fmoc-L-Lys(Boc)-COOH、Fmoc-D-iso-Gln-COOH、Fmoc-L-Ala-COOH可以替換為其它任意天然及非天然氨基酸。

6.根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，步驟3中紫杉醇或多西紫杉醇與胞壁酰二肽簡化物的共綴物的液相合成包括具體步驟如下：

1）首先，將紫杉醇或多西紫杉醇2′-O-烷烴二酸單酯與特定摩爾比例(2∶1-1∶2)的HOSu和DIC溶于二甲基亞砜或者N，N-二甲基甲酰胺、或者N-甲基吡咯烷酮等溶液中中，在-20°C-+50°C溫度范圍內(nèi)反應(yīng)1-10小時；

2）然后，將等摩爾比例的胞壁酰二肽簡化物加入上述二甲基亞砜、或者N，N-二甲基甲酰胺、或者N-甲基吡咯烷酮等溶液中，用N-甲基嗎啉等弱堿性試劑將反應(yīng)體系的pH值調(diào)節(jié)至6～8，繼續(xù)反應(yīng)1-10小時，反應(yīng)完全后形成共綴物；

3）最后，向反應(yīng)液中加入水、甲醇、乙醇、乙醚、石油醚、乙基丁基醚中的任意一種后析出固體，過濾，粗品經(jīng)制備HPLC法或重結(jié)晶法純化得到目標(biāo)產(chǎn)物。