[發明專利]黃麻鏈霉菌NF0919菌株代謝產物在防治草莓病害上的應用無效
申請號: | 201210361815.3 | 申請日: | 2012-09-26 |
公開(公告)號: | CN102864173A | 公開(公告)日: | 2013-01-09 |
發明(設計)人: | 楊敬輝;陳宏州;張文文;莊義慶 | 申請(專利權)人: | 江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所 |
主分類號: | C12P1/04 | 分類號: | C12P1/04;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/465 |
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地址: | 212400 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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摘要: | |||
搜索關鍵詞: | 黃麻 霉菌 nf0919 菌株 代謝 產物 防治 草莓 病害 應用 | ||
1.黃麻鏈霉菌(Streptomyces?corchorusii)NF0919菌株(該菌種特性見專利ZL?201010236886.1)發酵液中代謝產物的提取方法。
2.根據權利要求1所述的黃麻鏈霉菌NF0919菌株發酵液中代謝產物的提取物,在防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黃萎病上應用。
3.權利要求1所述的黃麻鏈霉菌NF0919菌株發酵液中代謝產物的提取方法,其特征在于包括以下步驟:
(A)菌株的活化與一級種子培養液的培養
將保存的NF0919菌株的斜面在高氏一號培養基上活化,30℃培養10?d,挑取1?cm2大小的菌塊接種于50?mL一級種子培養液中,置于170?rpm搖床上30℃振蕩培養44~48?h,其中所述的50?mL一級種子培養液的成分為:可溶性淀粉3%,葡萄糖2%,酵母粉1%,蛋白胨1%,NaCl?0.5%,K2HPO4??0.2%,可溶性淀粉、葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、NaCl?和K2HPO4??含量的單位比例為W/V;
(B)二級種子培養液的培養
將步驟(A)所得一級種子培養液按5%的接種量接入50?mL二級種子培養液中,170?rpm、30?℃搖床上培養48?-?52?h,其中所述的5%的單位比例為V/V;所述的50?mL二級種子培養液的成分:馬鈴薯淀粉8.5%,棉籽蛋白2.2%,CaCO3?0.1%,K2HPO4?0.05%,MgSO4?0.05%,淀粉酶0.01%,馬鈴薯淀粉、棉籽蛋白、CaCO3?、K2HPO4、MgSO4?和淀粉酶含量的單位比例為W/V;
(C)發酵培養液的培養
將步驟(B)所得二級種子培養液按5%的接種量接種于裝有160?L發酵培養液的容積為200?L的發酵罐中,其中所述的5%的單位比例為V/V,設置發酵參數為:溶氧100%,消泡劑(XP-100F系列發酵用有機硅消泡劑)1.6?L,攪拌速度為360?rpm,?發酵溫度為36?℃,發酵時間為72?h,pH?6.8~7.2,所述的發酵培養液的成分為:馬鈴薯淀粉8.5%,棉籽蛋白2.6%,K2HPO4?0.05%,NaCl?0.2%,MgSO4?0.05%,CaCO3?0.1%,pH7.2-7.4,馬鈴薯淀粉、棉籽蛋白、K2HPO4?、NaCl?、MgSO4?和CaCO3?含量的單位比例為W/V;
(D)NF0919菌株發酵液中代謝產物提取方法
把步驟(C)所得發酵液在10000?rpm離心5?min得上清液,用濃鹽酸調節pH至2.0,出現沉淀,再次離心,收集沉淀物,用乙酸乙酯萃取3次,35℃真空干燥得提取物。
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