[發明專利]補陽還五湯的鑒別和含量測定方法

有效

• 申請號: 201210361661.8
• 申請日: 2012-09-25
• 公開（公告）號: CN102879516A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 陸兔林;毛春芹;蔡寶昌;殷放宙;李林;嚴國俊;季德;張星
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/02
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

技術領域

本發明涉及中藥制劑質量控制領域，具體涉及一種補陽還五湯的鑒別和含量測定方法。?

背景技術

補陽還五湯出自《醫林改錯》下卷,由清代名醫王清任所創制，由生黃芪、當歸、赤芍、川芎、桃仁、地龍、紅花組成，具有補氣活血、化瘀通絡之功效，主要用于治療半身不遂，遺尿不禁等氣虛血瘀證，是臨床治療老年中風癥常用經驗方劑。但是目前有關補陽還五湯的質量標準、有效成分等深入研究很少，有限的研究報道也只是一鱗半爪。而對于同時測定補陽還五湯中多種成分的報道尚未見到。無論從繼承和發揚祖國醫藥的觀點，還是從當前人民用藥的需要，均有必要對補陽還五湯藥用標準、化學成分及作用機理深人研究和探討，以便開發利用。?

中藥長期以來，質量難以有效控制，有效控制中藥產品的質量是一個重大的課題，現有技術中采用的方法不完整，少數針對性不強，使用這些方法難以達到真正控制質量的目的。補陽還五湯由于缺少系統的質量控制方法，難以控制補陽還五湯的質量，以致正常的臨床用藥及療效無法保證，利用已知的一些技術難以對補陽還五湯提供好的質量控制方法。?

發明內容

為了解決上述問題，本發明的目的在于提供一種補陽還五湯的鑒別和含量測定方法，為了達到這個目地，采用如下技術方案：?

一種補陽還五湯的鑒別和含量測定方法，所述補陽還五湯是由如下原料及方法制備，取黃芪120g，當歸6g，赤芍5g，川芎3g、紅花3g、桃仁3g、地龍3g，于砂鍋中加相當于飲片10倍量的水，浸泡30min，煎煮30min，煎煮2次，兩層紗布過濾，合并濾液，濃縮，定容至300mL，制備成補陽還五湯，包括以下鑒別方法和同時測定芍藥苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、槲皮素的含量測定方法：?

A.黃芪的TLC鑒別取上述補陽還五湯10mL，用水飽和的正丁醇振搖提取，每次20mL，提取3次，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌，每次20mL，洗滌2次，棄?去氨試液，取正丁醇提取液，水浴蒸干，殘渣加蒸餾水3～5mL使之溶解，通過內徑為1.5cm，長度為12cm的D101大孔樹脂柱，加蒸餾水50mL洗脫，棄去水液，再用40%乙醇30mL洗脫，棄去洗脫液，再用70%乙醇80mL洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，用甲醇定容至5mL容量瓶，作為補陽還五湯供試品溶液；另精密稱取黃芪對照藥材4g，粉碎，按上述補陽還五湯供試品溶液的制備方法，自用水飽和的正丁醇振搖提取開始，制成黃芪對照藥材溶液，再按補陽還五湯制備方法制備缺黃芪的補陽還五湯陰性樣品，取缺黃芪的補陽還五湯陰性樣品溶液20mL，同樣方法制成缺黃芪的陰性對照溶液，分別吸取上述溶液各10μL，點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為30∶10∶1的二氯甲烷-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%硫酸乙醇溶液，于105℃加熱顯色，至斑點清晰，結果，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾；?

B.當歸薄層色譜鑒別取上述補陽還五湯25ml，加熱蒸干，加入乙醚10mL，加熱回流提取30min，放冷濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加乙醇1ml使溶解，作為供試品溶液，另精密稱取當歸對照藥材0.5g，粉碎，按上述補陽還五湯供試品溶液的制備方法，自用水飽和的正丁醇振搖提取開始，制成當歸對照藥材溶液，再按補陽還五湯制備方法制備缺當歸的補陽還五湯陰性樣品，取缺當歸的補陽還五湯陰性樣品溶液25mL，同樣方法制成缺當歸的陰性對照溶液，分別吸取上述三種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為4∶1的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置于波長為365nm的紫外光燈下檢視，結果，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯示相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾；?

C.赤芍的TLC鑒別取上述補陽還五湯30mL，加熱蒸干，加入70%甲醇20mL，超聲提取30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2mL使溶解，作為供試品溶液。另精密稱取赤芍對照藥材0.5g，粉碎，按上述補陽還五湯供試品溶液的制備方法，自用水飽和的正丁醇振搖提取開始，制成赤芍對照藥材溶液，再按補陽還五湯制備方法制備缺赤芍的補陽還五湯陰性樣品，取缺赤芍的補陽還五湯陰性樣品溶液20mL，同樣方法制成缺赤芍的陰性對照溶液，吸取上述3種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8∶1∶4的二氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，于105℃加熱顯色，至斑點顯色清晰，結果，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同的藍紫色的斑點，陰性對照無干擾；?