[發(fā)明專利]一種篩選中等直鏈淀粉含量水稻的方法及其專用引物

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210361030.6
• 申請(qǐng)日: 2012-09-26
• 公開（公告）號(hào): CN102912014A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 游艾青;周雷;陳志軍;馬銀花;陳少愚;楊國才;李三和;劉凱;胡剛;閘雯俊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 武漢荊楚聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42215
• 代理人: 王健

1.一種輔助篩選中等直鏈淀粉含量水稻的引物，包含序列表中的4條核苷酸序列WxMF：CAACCCATACTTCAAAGGAACATC、WxMR：GGCGGTGATGTACTTGTCC、WxH：CTGGAGAAGGTGGAGTC和WxHR：GATCTTGAGATCAATTGTAACTCACGAT。

2.一種輔助篩選中等直鏈淀粉含量水稻的方法，以待檢測(cè)水稻的基因組DNA為模板，用序列表中WxMF：CAACCCATACTTCAAAGGAACATC、WxMR：GGCGGTGATGTACTTGTCC、WxHF：CTGGAGAAGGTGGAGTCAT和WxHR：GATCTTGAGATCAATTGTAACTCACGAT的核苷酸序列的4條引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物帶型，如該待測(cè)水稻的擴(kuò)增產(chǎn)物中有766bp的條帶，則該待測(cè)水稻為候選中等直鏈淀粉含量水稻。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述PCR擴(kuò)增體系為：水稻基因組DNA模板50ng，Taq?DNA聚合酶1?U,?1.5μl?10×PCR緩沖液（100Mm?Tris-HCl?(pH8.3)，500Mm?KCl），25mM?MgCl₂?0.9ul，2.5?mmol?each?dNTPs?0.6ul，四條引物各0.2μΜ，最后用ddH₂O補(bǔ)充反應(yīng)體系至15μl。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于所述PCR反應(yīng)條件為：先95℃?5min；隨后95℃?30sec，55℃?30sec，?72℃?40sec，共35個(gè)循環(huán)；然后72℃?5min。

5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物帶型的方法是進(jìn)行1.5%瓊脂糖凝膠電泳。