[發明專利]一種蒲包花苷B的分離制備方法

無效

• 申請號: 201210360041.2
• 申請日: 2012-09-25
• 公開（公告）號: CN102863482A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 蘇劉花
• 申請（專利權）人: 南京澤朗農業發展有限公司
• 主分類號: C07H15/18
• 分類號: C07H15/18;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及中藥提取分離技術領域，具體地說是一種通過膜分離和制備型高效液相色譜技術分離制備蒲包花苷B的方法。

背景技術

蒲包花苷B為苯丙素苷類化合物，呈無定形粉末狀，分子式為C₂₃H₂₆O₁₁，分子量為478.45。分子結構式為：

。

蒲包花苷B主要存在于苦苣苔科、茶茱萸科、木犀科、車前科、薔薇科及玄參科等多種植物中。現代藥理研究表明，蒲包花苷B具有抗脂質過氧化作用，動物實驗表明，蒲包花苷對于大鼠肝微粒體中，由ADP+NADPH誘導的脂質過氧化的IC₅₀為0.40μM。

目前尚未見蒲包花苷B工業分離制備方法的相關報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種環保無污染、產品純度高，可以大規模生產的蒲包花苷B的分離制備方法。

為了達到上述目的，本發明采用技術方案為：

一種蒲包花苷B的分離制備方法，其特征在于：

（1）提取：取富含蒲包花苷B的藥材，加入藥材重量6-15倍的沸水浸提3次，每次1.5-2.5h，合并浸提液；

（2）大孔樹脂柱層析：將浸提液上樣于非極性大孔吸附樹脂柱，依次用蒸餾水和30-70%乙醇洗脫，收集洗脫液；

（3）膜分離：將洗脫液濃縮回收乙醇，經高速離心機離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統過濾，濾液再經過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；

（4）制備型高效液相色譜分離：以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以甲醇—水為流動相，梯度洗脫，紫外在線監測，收集目標成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B。

步驟（1）中所述富含蒲包花苷B的藥材可以是苦苣苔科植物喜蔭花全植物、木犀科植物水蠟樹的根或車前地上部分。

步驟（4）中所述甲醇—水流動相中甲醇的體積百分比為30-80%。

其特征在于步驟（4）中所述紫外在線監測波長為215nm。

本發明的有益效果是：本發明采用膜分離技術，提高了產品含量，且能耗低，采用制備液相色譜法分離純化，分離度高，產品純度高，能夠實現大規模生產。

具體實施方式：

實施例1：

將喜蔭花全株粉碎，稱取3kg，加入30kg沸水浸提3次，每次1.5h，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于HPD100型大孔樹脂柱，依次用蒸餾水和70%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮回收乙醇，經高速離心機離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統過濾，濾液再經過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以30-80%甲醇—水為流動相，梯度洗脫，取0.5g膜分離組分用10ml無水甲醇溶解，進樣，紫外在線監測，波長為215nm，收集目標成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B，含量95.3%（高效液相檢測），提率為70.8%。

實施例2：

將水蠟樹的根粉碎，稱取5kg，加入30kg沸水浸提3次，每次2h，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于HPD100型大孔樹脂柱，依次用蒸餾水和50%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮回收乙醇，經高速離心機離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統過濾，濾液再經過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以30-80%甲醇—水為流動相，梯度洗脫，取1g膜分離組分用20ml無水甲醇溶解，進樣，紫外在線監測，波長為215nm，收集目標成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B，含量97.8%（高效液相檢測），提率為72.6%。

實施例3：

將車前草地上部分粉碎，稱取5kg，加入75kg沸水浸提3次，每次2.5h，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于HPD100型大孔樹脂柱，依次用蒸餾水和30%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮回收乙醇，經高速離心機離心得到清液，通過截留分子量5000的超濾膜系統過濾，濾液再經過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以30-80%甲醇—水為流動相，梯度洗脫，將0.5g膜分離組分用20ml無水甲醇溶解，進樣，紫外在線監測，波長為215nm，收集目標成分，濃縮冷凍干燥即得蒲包花苷B，含量95.3%（高效液相檢測），提率為76.4%。