[發明專利]一種盤果菊苷A的提取純化方法

無效

• 申請號: 201210356698.1
• 申請日: 2012-09-24
• 公開（公告）號: CN102863490A
• 公開（公告）日: 2013-01-09
• 發明（設計）人: 蘇劉花
• 申請（專利權）人: 南京澤朗農業發展有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于制藥領域，具體涉及一種盤果菊苷A的提取純化方法。

背景技術

盤果菊苷A（Prenantheside?A)為倍半萜類化合物，分子式為C₂₁H₃₀O₉，分子量為426.46。呈無定形粉末狀，來源于菊科植物槭葉盤果菊Prenanthe?acerifolia?Benth.全植物，槭葉盤果菊在我國河北、遼寧等省區有廣泛分布。現代藥理研究表明，盤果菊苷A具有一定的細胞毒活性，對L-5178Y細胞株的ID₅₀為4.0μg/mL。

經檢索，尚無盤果菊苷A的工業生產方法的專利文獻報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種盤果菊苷A的提取純化方法。

本發明的盤果菊苷A的提取方法的技術方案包括以下步驟：

A．取槭葉盤果菊藥材粉碎，用有機溶劑加熱提取后，減壓濃縮得粗提取物，將粗提取物懸溶于水，用水飽和正丁醇萃取4-5次，萃取液減壓回收正丁醇至盡，得正丁醇萃取物；

B．將正丁醇萃取物濕法裝柱，葡聚糖凝膠LH-20為吸附劑，用量為被分離樣品量的20-30倍，以甲醇或乙醇水溶液洗脫，減壓回收試劑并濃縮，得濃縮液；

C．將濃縮液進行高壓硅膠柱層析，用石油醚-丙酮梯度洗脫，收集各洗脫部分，然后進行薄層層析收集含盤果菊苷A的流分，濃縮、干燥即得。

步驟A中所述提取用有機溶劑可選80-95%的乙醇、甲醇、丙酮溶液，提取方法可選回流、微波或超聲提取。

步驟B中所述甲醇或乙醇的體積百分比濃度為50%-70%。

步驟C中所述高壓硅膠柱的柱壓為2.1-3.4MPa，柱內徑為150-200mm，層析柱徑高比為1:12-15，硅膠目數為100-300目。

本發明的優點在于：本發明通過提取、萃取、連續柱層析分離純化以及結晶等步驟制備得到盤果菊苷A，耗時短、得率高、操作簡單、易于工業化；且本發明所提供的盤果菊苷A的提取純化方法所得產品含量高，為進一步開發利用提供了藥理原料、理論及實踐支持。

具體實施方式：

實施例1：

取槭葉盤果菊粗粉10kg，按質量比1:4加入85%的乙醇，65℃條件下加熱回流提取1.5小時，提取2次，過濾，濾液減壓回收得到粗提取物，將粗提取物加水混懸，用水飽和正丁醇萃取5次，合并正丁醇層，減壓回收正丁醇至盡，裝入Sephadex?LH-20凝膠柱（用量為流浸膏的20倍）上，以60%乙醇洗脫，根據TLC合并洗脫液，減壓回收試劑并濃縮，得到盤果菊苷A濃縮液，將濃縮液用甲醇溶解濕法上樣至填料200-300目硅膠高壓柱，其中高壓柱的柱壓為2.8MPa，柱內徑為200mm，層析柱徑高比為1:15，以石油醚-丙酮的混合溶劑，依次按體積比100:1、100:2、100:5、100:20洗脫，分段收集各流分，將含盤果菊苷A流分合并，減壓回收溶劑，自然干燥得到盤果菊苷A54mg，含量為98.26%。

實施例2：

取槭葉盤果菊粗粉10kg，按質量比1:5加入80%的甲醇，60℃條件下加熱回流提取2.0小時，提取3次，過濾，濾液減壓回收得到粗提取物，將粗提取物加水混懸，用水飽和正丁醇萃取4次，合并正丁醇層，減壓回收正丁醇至盡，裝入Sephadex?LH-20凝膠柱（用量為流浸膏的20倍）上，以55%乙醇洗脫，根據TLC合并洗脫液，減壓回收試劑并濃縮，得到盤果菊苷A濃縮液，將濃縮液用甲醇溶解濕法上樣至填料100-200目硅膠高壓柱，其中高壓柱的柱壓為3.2MPa，柱內徑為150mm，層析柱徑高比為1:12，以石油醚-丙酮的混合溶劑，依次按體積比100:1、100:2、100:5、100:20洗脫，分段收集各流分，將含盤果菊苷A流分合并，減壓回收溶劑，自然干燥得到盤果菊苷A48mg，含量為96.42%。

實施例3：