[發(fā)明專利]黃麻鏈霉菌NF0919菌株代謝產(chǎn)物在葡萄病害防治上的應(yīng)用無(wú)效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210354625.9 | 申請(qǐng)日: | 2012-09-23 |
| 公開(公告)號(hào): | CN102899356A | 公開(公告)日: | 2013-01-30 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 楊敬輝;陳宏州;莊義慶 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 |
| 主分類號(hào): | C12P1/04 | 分類號(hào): | C12P1/04;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/465 |
| 代理公司: | 暫無(wú)信息 | 代理人: | 暫無(wú)信息 |
| 地址: | 212400 江*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 黃麻 霉菌 nf0919 菌株 代謝 產(chǎn)物 葡萄 病害 防治 應(yīng)用 | ||
1.黃麻鏈霉菌(Streptomyces?corchorusii)NF0919菌株(該菌種特性見專利ZL?201010236886.1)發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的提取方法。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黃麻鏈霉菌NF0919菌株發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的提取物,在防治葡萄炭疽病、葡萄房枯病、葡萄穗軸褐腐病、葡萄灰霉病、葡萄黑痘病和葡萄白腐病上的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述的黃麻鏈霉菌NF0919菌株發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物的提取方法,其特征在于包括以下步驟:
(A)菌株的活化與一級(jí)種子培養(yǎng)液的培養(yǎng)
將保存的NF0919菌株的斜面在高氏一號(hào)培養(yǎng)基上活化,30℃培養(yǎng)10?d,挑取1?cm2大小的菌塊接種于50?mL一級(jí)種子培養(yǎng)液中,置于170?rpm搖床上30℃振蕩培養(yǎng)44~48?h,其中所述的50?mL一級(jí)種子培養(yǎng)液的成分為:可溶性淀粉3%,葡萄糖2%,酵母粉1%,蛋白胨1%,NaCl?0.5%,K2HPO4??0.2%,可溶性淀粉、葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、NaCl?和K2HPO4??含量的單位比例為W/V;
(B)二級(jí)種子培養(yǎng)液的培養(yǎng)
將步驟(A)所得一級(jí)種子培養(yǎng)液按5%的接種量接入50?mL二級(jí)種子培養(yǎng)液中,170?rpm、30?℃搖床上培養(yǎng)48?-?52?h,其中所述的5%的單位比例為V/V;所述的50?mL二級(jí)種子培養(yǎng)液的成分:馬鈴薯淀粉8.5%,棉籽蛋白2.2%,CaCO3?0.1%,K2HPO4?0.05%,MgSO4?0.05%,淀粉酶0.01%,馬鈴薯淀粉、棉籽蛋白、CaCO3?、K2HPO4、MgSO4?和淀粉酶含量的單位比例為W/V;
(C)發(fā)酵培養(yǎng)液的培養(yǎng)
將步驟(B)所得二級(jí)種子培養(yǎng)液按5%的接種量接種于裝有160?L發(fā)酵培養(yǎng)液的容積為200?L的發(fā)酵罐中,其中所述的5%的單位比例為V/V,設(shè)置發(fā)酵參數(shù)為:溶氧100%,消泡劑(XP-100F系列發(fā)酵用有機(jī)硅消泡劑)1.6?L,攪拌速度為360?rpm,?發(fā)酵溫度為36?℃,發(fā)酵時(shí)間為72?h,pH?6.8~7.2,所述的發(fā)酵培養(yǎng)液的成分為:馬鈴薯淀粉8.5%,棉籽蛋白2.6%,K2HPO4?0.05%,NaCl?0.2%,MgSO4?0.05%,CaCO3?0.1%,pH7.2-7.4,馬鈴薯淀粉、棉籽蛋白、K2HPO4?、NaCl?、MgSO4?和CaCO3?含量的單位比例為W/V;
(D)NF0919菌株發(fā)酵液中代謝產(chǎn)物提取方法
把步驟(C)所得發(fā)酵液在10000?rpm離心5?min得上清液,用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.0,出現(xiàn)沉淀,再次離心,收集沉淀物,用乙酸乙酯萃取3次,35℃真空干燥得提取物。
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