[發明專利]改良真菌菌種復蘇活化肉湯無效
| 申請號: | 201210354308.7 | 申請日: | 2012-09-21 |
| 公開(公告)號: | CN103667414A | 公開(公告)日: | 2014-03-26 |
| 發明(設計)人: | 于麗霞 | 申請(專利權)人: | 青島道合生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/04 | 分類號: | C12Q1/04 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266000 山東省*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 改良 真菌 菌種 復蘇 活化 肉湯 | ||
技術領域???本發明涉及一種改良真菌菌種復蘇活化肉湯,特別是一種改良真菌菌種復蘇活化肉湯的配方及其制備方法。其主要成分是蛋白胨、酵母浸膏粉、氯化鈉、蔗糖、酸水解酪蛋白、可溶性淀粉、?胰蛋白胨(或國產胰酪胨)、酵母粉、牛肉浸液制備而成;改良真菌菌種復蘇活化肉湯不含胸腺嘧啶,且鎂、鈣重金屬離子含量低,不干擾磺胺類藥及氨基糖類藥物的抑菌作用,所以適宜于真菌新啟菌種的復蘇培養。培養基是人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產物的營養基質,用以培養、分離、鑒定、保存各種微生物或積累代謝產物。就營養物質而言,一般不外乎碳源、氮源、無機鹽、生長因子及水等幾大類。在配制培養基時,根據各類微生物的特點,就可以配制出適合不同種類微生物生長發育所需要的培養基。培養基除了滿足微生物所必需營養物質外,還要求有一定的酸堿度和滲透壓。各類微生物對營養的要求不盡相同,因而培養基的種類繁多。培養基的制備程序方法,可因其種類不同而各異,即使同一種配方的培養基,各實驗室及生產廠家也會根據各自的經驗和原料質量的差異有所調整,因此,在批量配制之前,應先進行小量調配、預試,符合使用要求,再按確定的配方用料實施配制。培養基的pH值是溶液中氫離子活度的負對數值。各類微生物正常生長發育的最適pH范圍差異較大,所以,配制和使用培養基時,對其pH的調節和測定極為重要。培養基的pH值受多種因素影響,如加熱、高壓滅菌、溫度變化、緩沖容量等,在各類培養基最難配置的是真菌新啟菌種的復蘇培養。實驗室工作者一直希望能有一種能克服上述不足的、營養豐富的改良真菌菌種復蘇活化肉湯培養基,專用于新啟菌種的復蘇培養。
背景技術???本發明的目的在于提供一種改良真菌菌種復蘇活化肉湯,用于臨床規范鑒定,細菌培養和菌種傳代及靛基質、糖發酵等生化試驗用基礎培養基。改良真菌菌種復蘇活化肉湯營養豐富、配制簡單、選擇性強,與傳統培養基比較,檢出率高,污染小,臨床應用效果滿意.大大提高檢測陽性率,方法簡單、時間短、準確性高。是一種能克服上述不足的、營養豐富的改良真菌菌種復蘇活化肉湯培養基,專用于新啟菌種的復蘇培養。
發明內容????本發明的要點在于選擇合適的組分,并進行合理混配,經加溫、溶解、混合、冷卻、分裝、高溫滅菌等工藝而成一種改良真菌菌種復蘇活化肉湯培養基?。
本發明選擇的培養基配方如下(克、ml?/每升蒸餾水)蛋白胨22.0-25.0;氯化鈉20.0-25.0;蔗糖120.0-130.0;水解酪蛋白12.0-15.0;可溶性淀粉0.5-1.0;?胰蛋白胨5.0-7.0;酵母粉3.0-4.0;牛肉浸液1000mL。
干燥真菌菌種,在低滲環境中容易造成菌體破裂,在一般培養基上不能生長和存活,需在高滲環境中和較豐富的營養條件下才能存活和生長。高滲環境可在培養基中加入適量的鹽和糖來維持。
改良真菌菌種復蘇活化肉湯,原材料易得,制作方便,基礎成分加入營養豐富的牛肉浸粉、酵母浸膏粉,?酵母浸膏粉主要為微生物生長繁殖提供可溶性含氮物質、核酸降解物、維生素及無機鹽類等,以補充蛋白胨營養成分的不足部分。
將標本接種于培養基,25℃培養7~8天,每天觀察細菌生長情況,在此培養基中,真菌菌種復蘇活化呈現顆粒狀生長,顆粒可黏附于管壁或沉淀于管底。
本發明產品的制備方法是:
1)、將牛肉浸粉加水混合加熱溶解,校正pH7.4為牛肉浸液;
2)、蛋白胨、氯化鈉、蔗糖、酸水解酪蛋白、可溶性淀粉、胰蛋白胨、酵母粉加水混合加熱溶解,加牛肉浸液1000mL;
3)、過濾,分裝于帶翻口橡皮塞的玻璃試管,每管10-15?mL,經121℃15min高壓滅菌;
4)、25℃培養7天進行無菌試驗,合格者用鋁蓋壓封,嚴格無菌手續備用。
本發明具有以下優點:(1)?改良真菌菌種復蘇活化肉湯,營養豐富、配制簡單;(2)?選擇性強、方法靈敏、檢出率高、污染小,臨床應用效果滿意;(3)大大提高檢測陽性率,方法簡單、時間短、準確性高。(4)?靈敏度高、特異性強、穩定性好。
具體實施方式???下面結合實施例對本發明作進一步的詳細說明:
按照下表所列數據(克、ml?/每升蒸餾水)及其所述步驟進行配置:
配方一:
(克、ml?/每升蒸餾水)蛋白胨22.0-25.0;氯化鈉20.0-25.0;蔗糖120.0-130.0;水解酪蛋白12.0-15.0;可溶性淀粉0.5-1.0;?胰蛋白胨5.0-7.0;酵母粉3.0-4.0;牛肉浸液1000mL。
配方二:
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